郑州轻工业学院学报（自然科学版）
鄭州輕工業學院學報（自然科學版）
정주경공업학원학보（자연과학판）
JOURNAL OF ZHENGZHOU INSTITUTE OF LIGHT INDUSTRY(NATURAL SCIENCE)
2013年
6期
32-34,47
,共4页
侯丹丹%王云龙%张怡青%孙新城%李玉林%米海%王继创%程蕾
侯丹丹%王雲龍%張怡青%孫新城%李玉林%米海%王繼創%程蕾
후단단%왕운룡%장이청%손신성%리옥림%미해%왕계창%정뢰
麻疹病毒%核壳蛋白%原核表达%蛋白纯化
痳疹病毒%覈殼蛋白%原覈錶達%蛋白純化
마진병독%핵각단백%원핵표체%단백순화
measles virus%N protein%prokaryotic expression%protein purification
通过构建重组表达质粒，诱导表达纯化麻疹病毒 N 蛋白．将麻疹病毒 N 蛋白基因片段与载体pET -32a（＋）相连接，通过 PCR 方法扩增获得重组质粒 pET -32a（＋）/N，然后将重组质粒转入大肠杆菌 E．coli BL21（DE3）内，并优化诱导表达时间、温度、诱导剂浓度等条件．SDS -PAGE 和 West-ern blot 蛋白印迹检测表明，麻疹病毒 N 蛋白分子质量约为60 kD，表达产物用 Ni -NTA 亲和层析和DEAE 纯化后，纯度达90％．
通過構建重組錶達質粒，誘導錶達純化痳疹病毒 N 蛋白．將痳疹病毒 N 蛋白基因片段與載體pET -32a（＋）相連接，通過 PCR 方法擴增穫得重組質粒 pET -32a（＋）/N，然後將重組質粒轉入大腸桿菌 E．coli BL21（DE3）內，併優化誘導錶達時間、溫度、誘導劑濃度等條件．SDS -PAGE 和 West-ern blot 蛋白印跡檢測錶明，痳疹病毒 N 蛋白分子質量約為60 kD，錶達產物用 Ni -NTA 親和層析和DEAE 純化後，純度達90％．
통과구건중조표체질립，유도표체순화마진병독 N 단백．장마진병독 N 단백기인편단여재체pET -32a（＋）상련접，통과 PCR 방법확증획득중조질립 pET -32a（＋）/N，연후장중조질립전입대장간균 E．coli BL21（DE3）내，병우화유도표체시간、온도、유도제농도등조건．SDS -PAGE 화 West-ern blot 단백인적검측표명，마진병독 N 단백분자질량약위60 kD，표체산물용 Ni -NTA 친화층석화DEAE 순화후，순도체90％．
In order to construct a recombinant expression plasmid which induced express purification mea-sles virus(MV)N protein,the recombinant plamised of pET-32 a (+)/N amplified by PCR from MV N protein genes was inserted into expression vector pET-32 a (+),then it was transformed into E.coli BL21 (DE3).The condition of time,temperature and concentration of IPTG were optimized.The results of SDS-PAGE and Western blot tests showed that MV N protein molecular was 60 kD.The protein′s purity was 90% after being purified by Ni-NTA and DEAE.
