医药前沿
醫藥前沿
의약전연
YIAYAO QIANYAN
2014年
6期
158-159
,共2页
GM-CSF%原核表达%构建
GM-CSF%原覈錶達%構建
GM-CSF%원핵표체%구건
目的：克隆编码人粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的重组原核表达质粒,为进一步研究其功能提供依据。方法 PCR扩增人GM-CSF基因编码序列,定向克隆入融合蛋白原核表达载体PET32a+获得重组表达质粒,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达,PCR和Western-blot鉴定表达产物。结果重组质粒经PCR、限制性内切酶及DNA测序证实构建成功；且诱导后能在大肠杆菌中稳定表达PET-GMCSF嵌合蛋白。结论成功构建并表达了PET-GMCSF蛋白,为进一步研究GM-CSF功能奠定基础。
目的：剋隆編碼人粒-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)的重組原覈錶達質粒,為進一步研究其功能提供依據。方法 PCR擴增人GM-CSF基因編碼序列,定嚮剋隆入融閤蛋白原覈錶達載體PET32a+穫得重組錶達質粒,轉化大腸桿菌後用IPTG進行誘導錶達,PCR和Western-blot鑒定錶達產物。結果重組質粒經PCR、限製性內切酶及DNA測序證實構建成功；且誘導後能在大腸桿菌中穩定錶達PET-GMCSF嵌閤蛋白。結論成功構建併錶達瞭PET-GMCSF蛋白,為進一步研究GM-CSF功能奠定基礎。
목적：극륭편마인립-거서세포집락자격인자(GM-CSF)적중조원핵표체질립,위진일보연구기공능제공의거。방법 PCR확증인GM-CSF기인편마서렬,정향극륭입융합단백원핵표체재체PET32a+획득중조표체질립,전화대장간균후용IPTG진행유도표체,PCR화Western-blot감정표체산물。결과중조질립경PCR、한제성내절매급DNA측서증실구건성공；차유도후능재대장간균중은정표체PET-GMCSF감합단백。결론성공구건병표체료PET-GMCSF단백,위진일보연구GM-CSF공능전정기출。
