作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2013年
11期
1962-1969
,共8页
范昕琦%刘章伟%冯娟%徐鹏%张香桂%沈新莲
範昕琦%劉章偉%馮娟%徐鵬%張香桂%瀋新蓮
범흔기%류장위%풍연%서붕%장향계%침신련
旱地棉%苏氨酸醛缩酶%耐盐性%结构特征%功能分析
旱地棉%囌氨痠醛縮酶%耐鹽性%結構特徵%功能分析
한지면%소안산철축매%내염성%결구특정%공능분석
Gossypium aridum%Threonine aldolase%Salt tolerance%Structural characterization%Functional analysis
盐胁迫是影响作物生长和发育的重要因素之一.一些棉属野生种具有较好的耐盐性,是开展棉花耐盐性机制研究以及改良陆地棉耐盐性的重要资源.本研究基于cDNA-AFLP技术分离获得的旱地棉(Gossypium aridum)盐胁迫下差异表达片段序列信息,经电子克隆技术和RT-PCR方法克隆了旱地棉苏氨酸醛缩酶基因cDNA全长,命名为GarTHA (GenBank登录号为KC167360).该cDNA全长为1018 bp,包含一个822 bp的完整ORF,编码273个氨基酸残基,蛋白质分子量为82.57 kD,等电点为4.89.GarTHA基因与杨树PtTHA基因同源性最高,为84.6%.为进一步验证其功能,利用拟南芥逆境胁迫启动子rd29A构建植物表达载体,将GarTHA基因的完整ORF转入拟南芥中,获得转基因植株并进行了耐盐性鉴定.结果表明,在盐胁迫下转基因拟南芥种子的发芽率明显高于野生型,且转基因植株的根长显著高于野生型.说明GarTHA基因可能参与植物的盐胁迫反应,从而提高植物抗逆性.
鹽脅迫是影響作物生長和髮育的重要因素之一.一些棉屬野生種具有較好的耐鹽性,是開展棉花耐鹽性機製研究以及改良陸地棉耐鹽性的重要資源.本研究基于cDNA-AFLP技術分離穫得的旱地棉(Gossypium aridum)鹽脅迫下差異錶達片段序列信息,經電子剋隆技術和RT-PCR方法剋隆瞭旱地棉囌氨痠醛縮酶基因cDNA全長,命名為GarTHA (GenBank登錄號為KC167360).該cDNA全長為1018 bp,包含一箇822 bp的完整ORF,編碼273箇氨基痠殘基,蛋白質分子量為82.57 kD,等電點為4.89.GarTHA基因與楊樹PtTHA基因同源性最高,為84.6%.為進一步驗證其功能,利用擬南芥逆境脅迫啟動子rd29A構建植物錶達載體,將GarTHA基因的完整ORF轉入擬南芥中,穫得轉基因植株併進行瞭耐鹽性鑒定.結果錶明,在鹽脅迫下轉基因擬南芥種子的髮芽率明顯高于野生型,且轉基因植株的根長顯著高于野生型.說明GarTHA基因可能參與植物的鹽脅迫反應,從而提高植物抗逆性.
염협박시영향작물생장화발육적중요인소지일.일사면속야생충구유교호적내염성,시개전면화내염성궤제연구이급개량륙지면내염성적중요자원.본연구기우cDNA-AFLP기술분리획득적한지면(Gossypium aridum)염협박하차이표체편단서렬신식,경전자극륭기술화RT-PCR방법극륭료한지면소안산철축매기인cDNA전장,명명위GarTHA (GenBank등록호위KC167360).해cDNA전장위1018 bp,포함일개822 bp적완정ORF,편마273개안기산잔기,단백질분자량위82.57 kD,등전점위4.89.GarTHA기인여양수PtTHA기인동원성최고,위84.6%.위진일보험증기공능,이용의남개역경협박계동자rd29A구건식물표체재체,장GarTHA기인적완정ORF전입의남개중,획득전기인식주병진행료내염성감정.결과표명,재염협박하전기인의남개충자적발아솔명현고우야생형,차전기인식주적근장현저고우야생형.설명GarTHA기인가능삼여식물적염협박반응,종이제고식물항역성.