湖南师范大学自然科学学报
湖南師範大學自然科學學報
호남사범대학자연과학학보
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NORMALIS HUNANENSIS
2013年
5期
70-74
,共5页
CYP2D6%表达载体%微粒体蛋白%Km值
CYP2D6%錶達載體%微粒體蛋白%Km值
CYP2D6%표체재체%미립체단백%Km치
CYP2D6%expression vector%microsomal protein%Km value
根据G eneBank数据库中人CYP2D6基因构建表达载体pMA91-CYP2D6,转化酵母细胞AH22在体外进行表达,抽提所表达的CYP2D6微粒体蛋白进行Western Blot验证表明表达成功.该微粒体蛋白与探针药物异喹胍反应,利用HPLC检测生成产物4-羟基异喹胍,通过分析其得到酶动力学参数Km=10.14±0.94 μmol/L,最终建立起完整的人CYP2D6表达体系和功能研究方法,为未来测定CYP2D6各等位基因对应酶的活性,实现临床个性化用药奠定基础.
根據G eneBank數據庫中人CYP2D6基因構建錶達載體pMA91-CYP2D6,轉化酵母細胞AH22在體外進行錶達,抽提所錶達的CYP2D6微粒體蛋白進行Western Blot驗證錶明錶達成功.該微粒體蛋白與探針藥物異喹胍反應,利用HPLC檢測生成產物4-羥基異喹胍,通過分析其得到酶動力學參數Km=10.14±0.94 μmol/L,最終建立起完整的人CYP2D6錶達體繫和功能研究方法,為未來測定CYP2D6各等位基因對應酶的活性,實現臨床箇性化用藥奠定基礎.
근거G eneBank수거고중인CYP2D6기인구건표체재체pMA91-CYP2D6,전화효모세포AH22재체외진행표체,추제소표체적CYP2D6미립체단백진행Western Blot험증표명표체성공.해미립체단백여탐침약물이규고반응,이용HPLC검측생성산물4-간기이규고,통과분석기득도매동역학삼수Km=10.14±0.94 μmol/L,최종건립기완정적인CYP2D6표체체계화공능연구방법,위미래측정CYP2D6각등위기인대응매적활성,실현림상개성화용약전정기출.
