华中农业大学学报
華中農業大學學報
화중농업대학학보
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
6期
106-109
,共4页
李向阳%王学理%刘凯%霍晓伟%武迎红%张显华
李嚮暘%王學理%劉凱%霍曉偉%武迎紅%張顯華
리향양%왕학리%류개%곽효위%무영홍%장현화
甲酰基转移酶基因(Wbkc)%牛布鲁氏菌%原核表达%抗原性
甲酰基轉移酶基因(Wbkc)%牛佈魯氏菌%原覈錶達%抗原性
갑선기전이매기인(Wbkc)%우포로씨균%원핵표체%항원성
Wbkc gene%Brucella%prokaryotic expression%antigenicity
克隆牛布鲁氏菌的甲酰基转移酶基因(Wbkc),在大肠杆菌中表达/纯化,并对甲酰基转移酶的抗原性进行分析.以牛布鲁氏菌的染色体DNA为模板,扩增Wbkc基因,双酶切后克隆至pET-28a上,在大肠杆菌BL21中诱导表达,His Trap FF层析柱纯化,Western blot鉴定甲酰基转移酶的抗原性.提取的重组质粒经PCR鉴定、双酶切鉴定和测序分析确定目的基因成功插入到了克隆载体中.SDS-PAGE分析证明,表达产物为相对分子质量29 000的融合蛋白.Western blot结果表明,表达的蛋白具有特异的免疫反应原性.
剋隆牛佈魯氏菌的甲酰基轉移酶基因(Wbkc),在大腸桿菌中錶達/純化,併對甲酰基轉移酶的抗原性進行分析.以牛佈魯氏菌的染色體DNA為模闆,擴增Wbkc基因,雙酶切後剋隆至pET-28a上,在大腸桿菌BL21中誘導錶達,His Trap FF層析柱純化,Western blot鑒定甲酰基轉移酶的抗原性.提取的重組質粒經PCR鑒定、雙酶切鑒定和測序分析確定目的基因成功插入到瞭剋隆載體中.SDS-PAGE分析證明,錶達產物為相對分子質量29 000的融閤蛋白.Western blot結果錶明,錶達的蛋白具有特異的免疫反應原性.
극륭우포로씨균적갑선기전이매기인(Wbkc),재대장간균중표체/순화,병대갑선기전이매적항원성진행분석.이우포로씨균적염색체DNA위모판,확증Wbkc기인,쌍매절후극륭지pET-28a상,재대장간균BL21중유도표체,His Trap FF층석주순화,Western blot감정갑선기전이매적항원성.제취적중조질립경PCR감정、쌍매절감정화측서분석학정목적기인성공삽입도료극륭재체중.SDS-PAGE분석증명,표체산물위상대분자질량29 000적융합단백.Western blot결과표명,표체적단백구유특이적면역반응원성.
