东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
10期
44-50
,共7页
胡宝忠%黄莎莎%李凤兰%王多佳
鬍寶忠%黃莎莎%李鳳蘭%王多佳
호보충%황사사%리봉란%왕다가
膨胀素%毕赤酵母%黄瓜%纤维素%协同作用
膨脹素%畢赤酵母%黃瓜%纖維素%協同作用
팽창소%필적효모%황과%섬유소%협동작용
expansin%Pichia pastoris%cucumber%cellulase%synergism
采用RT-PCR法从矮化黄瓜D0462中分离膨胀素基因Cs-EXPA1,并将其与毕赤酵母分泌型表达载体pGAPHαM连接,形成重组质粒pGAPHαM-EXPA1.通过电击转化法将重组质粒转化到巴氏德毕赤酵母GS115中,经检测膨胀素基因通过同源重组整合到毕赤酵母染色体上,成功获得重组菌株.该菌株在摇床培养条件下可在上清液中检测到膨胀素蛋白.该蛋白不具有单独水解纤维素的活性,但在纤维素酶水解纤维素时却具有协同水解纤维素的活性.文章初步确定膨胀素协同水解纤维素的最佳时间36h、最适pH 4.0～5.0、最适温度50℃.研究可为提高纤维素的酶水解效率提供理论参考.
採用RT-PCR法從矮化黃瓜D0462中分離膨脹素基因Cs-EXPA1,併將其與畢赤酵母分泌型錶達載體pGAPHαM連接,形成重組質粒pGAPHαM-EXPA1.通過電擊轉化法將重組質粒轉化到巴氏德畢赤酵母GS115中,經檢測膨脹素基因通過同源重組整閤到畢赤酵母染色體上,成功穫得重組菌株.該菌株在搖床培養條件下可在上清液中檢測到膨脹素蛋白.該蛋白不具有單獨水解纖維素的活性,但在纖維素酶水解纖維素時卻具有協同水解纖維素的活性.文章初步確定膨脹素協同水解纖維素的最佳時間36h、最適pH 4.0～5.0、最適溫度50℃.研究可為提高纖維素的酶水解效率提供理論參攷.
채용RT-PCR법종왜화황과D0462중분리팽창소기인Cs-EXPA1,병장기여필적효모분비형표체재체pGAPHαM련접,형성중조질립pGAPHαM-EXPA1.통과전격전화법장중조질립전화도파씨덕필적효모GS115중,경검측팽창소기인통과동원중조정합도필적효모염색체상,성공획득중조균주.해균주재요상배양조건하가재상청액중검측도팽창소단백.해단백불구유단독수해섬유소적활성,단재섬유소매수해섬유소시각구유협동수해섬유소적활성.문장초보학정팽창소협동수해섬유소적최가시간36h、최괄pH 4.0～5.0、최괄온도50℃.연구가위제고섬유소적매수해효솔제공이론삼고.
