中华临床医师杂志（电子版）
中華臨床醫師雜誌（電子版）
중화림상의사잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF CLINICIANS(ELECTRONIC VERSION)
2013年
16期
69-72
,共4页
卞洲艳%杨政%徐蔓%张洁钰%廖海含%唐其柱
卞洲豔%楊政%徐蔓%張潔鈺%廖海含%唐其柱
변주염%양정%서만%장길옥%료해함%당기주
大鼠,Sprague-Dawley%胚胎结构%TALEN%显微注射%敲除
大鼠,Sprague-Dawley%胚胎結構%TALEN%顯微註射%敲除
대서,Sprague-Dawley%배태결구%TALEN%현미주사%고제
Rats,Sprague-Dawley%Embryonic stuructures%TALEN%Microinjection%Knockout
目的 建立Sprague-Dawley (SD)大鼠1-细胞胚胎体外培养体系,并用于TALEN质粒内源活性检测.方法 超排4～6周龄雌鼠,取0.5 dpc雌鼠受精卵.将构建的TALEN质粒体外转录为mRNA后显微注射于受精卵胞质中,将注射成功的受精卵培养于mR2ECM培养液中.巢式PCR扩增目的基因,送测序检测TALEN质粒的敲除效率.结果取出的1-细胞胚胎在mR2ECM培养液中最大程度能发育到8-细胞胚胎;培养液的pH值影响了胚胎的发育程度,过滤前pH值7.18±0.12的培养液,胚胎8细胞发育率较高.本研究送检三批显微注射后体外培养的胚胎,检测结果表明胚胎发育至4细胞以上时,mRNA已经能够充分表达和发挥敲除作用,TALEN质粒的敲除效率为(9.3±2.8)％.结论 建立SD大鼠l-细胞胚胎体外培养的体系,且将其成功应用于TALEN质粒内源活性检测.
目的 建立Sprague-Dawley (SD)大鼠1-細胞胚胎體外培養體繫,併用于TALEN質粒內源活性檢測.方法 超排4～6週齡雌鼠,取0.5 dpc雌鼠受精卵.將構建的TALEN質粒體外轉錄為mRNA後顯微註射于受精卵胞質中,將註射成功的受精卵培養于mR2ECM培養液中.巢式PCR擴增目的基因,送測序檢測TALEN質粒的敲除效率.結果取齣的1-細胞胚胎在mR2ECM培養液中最大程度能髮育到8-細胞胚胎;培養液的pH值影響瞭胚胎的髮育程度,過濾前pH值7.18±0.12的培養液,胚胎8細胞髮育率較高.本研究送檢三批顯微註射後體外培養的胚胎,檢測結果錶明胚胎髮育至4細胞以上時,mRNA已經能夠充分錶達和髮揮敲除作用,TALEN質粒的敲除效率為(9.3±2.8)％.結論 建立SD大鼠l-細胞胚胎體外培養的體繫,且將其成功應用于TALEN質粒內源活性檢測.
목적 건립Sprague-Dawley (SD)대서1-세포배태체외배양체계,병용우TALEN질립내원활성검측.방법 초배4～6주령자서,취0.5 dpc자서수정란.장구건적TALEN질립체외전록위mRNA후현미주사우수정란포질중,장주사성공적수정란배양우mR2ECM배양액중.소식PCR확증목적기인,송측서검측TALEN질립적고제효솔.결과취출적1-세포배태재mR2ECM배양액중최대정도능발육도8-세포배태;배양액적pH치영향료배태적발육정도,과려전pH치7.18±0.12적배양액,배태8세포발육솔교고.본연구송검삼비현미주사후체외배양적배태,검측결과표명배태발육지4세포이상시,mRNA이경능구충분표체화발휘고제작용,TALEN질립적고제효솔위(9.3±2.8)％.결론 건립SD대서l-세포배태체외배양적체계,차장기성공응용우TALEN질립내원활성검측.
