猪链球菌真核样丝氨酸/苏氨酸激酶stk基因敲除株的构建
저련구균진핵양사안산/소안산격매stk기인고제주적구건
Development of the eukaryotic-like Ser/Thr kinase stk gene knock-out mutant of Streptococcus suis
  • 万方数据
    中国人兽共患病学报 중국인수공환병학보
    CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
    2013年 12期 1162-1167 ,共6页

    杜骁杰%王玲%郑峰%李敏%王晶%胡丹%李先富%王长军%潘秀珍

    두효걸%왕령%정봉%리민%왕정%호단%리선부%왕장군%반수진

    猪链球菌%真核样丝氨酸/苏氨酸激酶%基因敲除%突变株 豬鏈毬菌%真覈樣絲氨痠/囌氨痠激酶%基因敲除%突變株
    저련구균%진핵양사안산/소안산격매%기인고제%돌변주
    Streptococcus suis%eukaryotic-like Ser/Thr kinase%gene knock-out%mutant
    目的 构建猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)2型强毒株05ZYH33真核样丝氨酸/苏氨酸激酶(eukaryoticlike Ser/Thr kinase,eSTK) stk基因敲除突变株.方法 构建中间为壮观霉素抗性基因(Spcr),两侧为stk编码基因上下游同源序列的基因敲除质粒,通过同源重组筛选stk编码基因敲除突变株.结果 组合PCR分析和基因测序结果均显示stk编码基因完全被壮观霉素抗性基因替代,基因敲除突变株△stk构建成功.逆转录PCR(RT-PCR)证实了stk在转录水平上的缺失.对筛选的突变株进行连续传代培养,证实△stk能够保持稳定的壮观霉素抗性表型.结论 stk基因敲除突变株的成功构建,为阐明该基因在猪链球菌致病过程中的作用奠定基础.
    목적 구건저련구균(Streptococcus suis,S.suis)2형강독주05ZYH33진핵양사안산/소안산격매(eukaryoticlike Ser/Thr kinase,eSTK) stk기인고제돌변주.방법 구건중간위장관매소항성기인(Spcr),량측위stk편마기인상하유동원서렬적기인고제질립,통과동원중조사선stk편마기인고제돌변주.결과 조합PCR분석화기인측서결과균현시stk편마기인완전피장관매소항성기인체대,기인고제돌변주△stk구건성공.역전록PCR(RT-PCR)증실료stk재전록수평상적결실.대사선적돌변주진행련속전대배양,증실△stk능구보지은정적장관매소항성표형.결론 stk기인고제돌변주적성공구건,위천명해기인재저련구균치병과정중적작용전정기출.
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