生物骨科材料与临床研究
生物骨科材料與臨床研究
생물골과재료여림상연구
ORTHOPAEDIC BIOMECHANICS MATERIALS AND CLINICAL STUDY
2014年
1期
10-15,后插2
,共7页
康健%侯洋%周许辉%杨立利%陈华江%唐先业%袁文
康健%侯洋%週許輝%楊立利%陳華江%唐先業%袁文
강건%후양%주허휘%양립리%진화강%당선업%원문
兔骨髓间充质干细胞%全骨髓贴壁法%诱导分化%转化生长因子β3%骨形态发生蛋白7
兔骨髓間充質榦細胞%全骨髓貼壁法%誘導分化%轉化生長因子β3%骨形態髮生蛋白7
토골수간충질간세포%전골수첩벽법%유도분화%전화생장인자β3%골형태발생단백7
BMSCs%All bone marrow adherence method%Induced differentiation%TGF-β3%BMP-7
目的 明确兔骨髓间充质干细胞的分化能力及分化条件,以TGF-β3和BMP-7诱导兔骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化,为组织工程髓核的构建提供良好的种子细胞.方法 利用全骨髓贴壁法分离获取兔骨髓间充质干细胞,并对细胞进行培养和传代,以特定的环境及细胞诱导液进行诱导,促使其向特定的中胚层细胞分化.再将细胞分为四组,A:空白对照组,B:BMP-7诱导组,C:TGF-β3诱导组,D:TGF-p3与BMP-7共同诱导组,诱导21天后对蛋白聚糖、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原和SOX9基因进行realtime-PCR检测.结果 全骨髓贴壁法分离获得的原代兔骨髓间充质干细胞生长良好,2周后显微镜下观察细胞间形态较为一致,成纺锤形.细胞传代后生长良好.细胞表面表达CD29、CD105、CD166表面标记物.在成骨诱导培养液、成软骨诱导培养液和脂肪诱导培养液的诱导下,培养21天后,通过特定染色发现兔骨髓间充质干细胞向预定方向分化生长.以TGF-β3和BMP-7生长因子诱导21天后,蛋白聚糖、Ⅱ型胶原和SOX9基因表达C组和D组明显高于A组和B组(P＜0.05),Ⅹ型胶原表达A组和B组明显高于C组和D组(P＜0.05),Ⅰ型胶原表达四组之间无明显差异.结论 全骨髓贴壁法可以成功分离获得状态良好的兔骨髓间充质干细胞,在成骨诱导培养液、成软骨诱导培养液和脂肪诱导培养液的诱导下,兔骨髓间充质干细胞可向预定的方向分化且生长良好.TGF-β3和BMP-7诱导兔骨髓间充质干细胞后可明显提高其类髓核细胞具有的下游基因表达水平.
目的 明確兔骨髓間充質榦細胞的分化能力及分化條件,以TGF-β3和BMP-7誘導兔骨髓間充質榦細胞嚮類髓覈細胞分化,為組織工程髓覈的構建提供良好的種子細胞.方法 利用全骨髓貼壁法分離穫取兔骨髓間充質榦細胞,併對細胞進行培養和傳代,以特定的環境及細胞誘導液進行誘導,促使其嚮特定的中胚層細胞分化.再將細胞分為四組,A:空白對照組,B:BMP-7誘導組,C:TGF-β3誘導組,D:TGF-p3與BMP-7共同誘導組,誘導21天後對蛋白聚糖、Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原、Ⅹ型膠原和SOX9基因進行realtime-PCR檢測.結果 全骨髓貼壁法分離穫得的原代兔骨髓間充質榦細胞生長良好,2週後顯微鏡下觀察細胞間形態較為一緻,成紡錘形.細胞傳代後生長良好.細胞錶麵錶達CD29、CD105、CD166錶麵標記物.在成骨誘導培養液、成軟骨誘導培養液和脂肪誘導培養液的誘導下,培養21天後,通過特定染色髮現兔骨髓間充質榦細胞嚮預定方嚮分化生長.以TGF-β3和BMP-7生長因子誘導21天後,蛋白聚糖、Ⅱ型膠原和SOX9基因錶達C組和D組明顯高于A組和B組(P＜0.05),Ⅹ型膠原錶達A組和B組明顯高于C組和D組(P＜0.05),Ⅰ型膠原錶達四組之間無明顯差異.結論 全骨髓貼壁法可以成功分離穫得狀態良好的兔骨髓間充質榦細胞,在成骨誘導培養液、成軟骨誘導培養液和脂肪誘導培養液的誘導下,兔骨髓間充質榦細胞可嚮預定的方嚮分化且生長良好.TGF-β3和BMP-7誘導兔骨髓間充質榦細胞後可明顯提高其類髓覈細胞具有的下遊基因錶達水平.
목적 명학토골수간충질간세포적분화능력급분화조건,이TGF-β3화BMP-7유도토골수간충질간세포향류수핵세포분화,위조직공정수핵적구건제공량호적충자세포.방법 이용전골수첩벽법분리획취토골수간충질간세포,병대세포진행배양화전대,이특정적배경급세포유도액진행유도,촉사기향특정적중배층세포분화.재장세포분위사조,A:공백대조조,B:BMP-7유도조,C:TGF-β3유도조,D:TGF-p3여BMP-7공동유도조,유도21천후대단백취당、Ⅰ형효원、Ⅱ형효원、Ⅹ형효원화SOX9기인진행realtime-PCR검측.결과 전골수첩벽법분리획득적원대토골수간충질간세포생장량호,2주후현미경하관찰세포간형태교위일치,성방추형.세포전대후생장량호.세포표면표체CD29、CD105、CD166표면표기물.재성골유도배양액、성연골유도배양액화지방유도배양액적유도하,배양21천후,통과특정염색발현토골수간충질간세포향예정방향분화생장.이TGF-β3화BMP-7생장인자유도21천후,단백취당、Ⅱ형효원화SOX9기인표체C조화D조명현고우A조화B조(P＜0.05),Ⅹ형효원표체A조화B조명현고우C조화D조(P＜0.05),Ⅰ형효원표체사조지간무명현차이.결론 전골수첩벽법가이성공분리획득상태량호적토골수간충질간세포,재성골유도배양액、성연골유도배양액화지방유도배양액적유도하,토골수간충질간세포가향예정적방향분화차생장량호.TGF-β3화BMP-7유도토골수간충질간세포후가명현제고기류수핵세포구유적하유기인표체수평.
