基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
1期
93-97
,共5页
张丰经%何红云%邓仪昊%杨开明
張豐經%何紅雲%鄧儀昊%楊開明
장봉경%하홍운%산의호%양개명
重组卡介苗%IL-12p70%TB10.4%免疫效应
重組卡介苗%IL-12p70%TB10.4%免疫效應
중조잡개묘%IL-12p70%TB10.4%면역효응
recombinant BCG%IL-12p70%TB10.4%immunization efficacy
目的 将成功构建的重组卡介苗rBCG-IL-12p70-TB10.4免疫BALB/c小鼠,研究其免疫效应,为结核病新疫苗的研发提供依据.方法 将融合基因IL-12p70-TB10.4克隆入pMV361构建重组质粒,以电转化方式将重组质粒导入卡介苗基因组,构建重组结核病疫苗rBCG-12p70-TB10.4 (rBCG-IT).将此重组卡介苗免疫BALB/c小鼠,分别于免疫后3、6、9和12周,用间接ELISA检测特异性抗体滴度水平,XTT检测脾细胞增值反应,流式细胞仪检测脾CD4+T、CD8+T细胞亚型的比例,ELISA试剂盒检测细胞因子的诱生.结果 在免疫后3～12周,rBCG-IT组脾细胞增殖反应均明显强于其他各组(P＜0.01),该组IFN-γ诱生量及CD4+T细胞比例均显著高于rBCG-I组、rBCG-T组及BCG组(P＜0.01).IgG2a/IgG1比值在免疫后各时间点的变化趋势提示rBCG-IT可诱导Th1型细胞免疫应答.结论 重组疫苗rBCG-IT可诱导产生较BCG更强、持续时间更长的特异性细胞免疫应答,可对其免疫保护作用进行深入研究.
目的 將成功構建的重組卡介苗rBCG-IL-12p70-TB10.4免疫BALB/c小鼠,研究其免疫效應,為結覈病新疫苗的研髮提供依據.方法 將融閤基因IL-12p70-TB10.4剋隆入pMV361構建重組質粒,以電轉化方式將重組質粒導入卡介苗基因組,構建重組結覈病疫苗rBCG-12p70-TB10.4 (rBCG-IT).將此重組卡介苗免疫BALB/c小鼠,分彆于免疫後3、6、9和12週,用間接ELISA檢測特異性抗體滴度水平,XTT檢測脾細胞增值反應,流式細胞儀檢測脾CD4+T、CD8+T細胞亞型的比例,ELISA試劑盒檢測細胞因子的誘生.結果 在免疫後3～12週,rBCG-IT組脾細胞增殖反應均明顯彊于其他各組(P＜0.01),該組IFN-γ誘生量及CD4+T細胞比例均顯著高于rBCG-I組、rBCG-T組及BCG組(P＜0.01).IgG2a/IgG1比值在免疫後各時間點的變化趨勢提示rBCG-IT可誘導Th1型細胞免疫應答.結論 重組疫苗rBCG-IT可誘導產生較BCG更彊、持續時間更長的特異性細胞免疫應答,可對其免疫保護作用進行深入研究.
목적 장성공구건적중조잡개묘rBCG-IL-12p70-TB10.4면역BALB/c소서,연구기면역효응,위결핵병신역묘적연발제공의거.방법 장융합기인IL-12p70-TB10.4극륭입pMV361구건중조질립,이전전화방식장중조질립도입잡개묘기인조,구건중조결핵병역묘rBCG-12p70-TB10.4 (rBCG-IT).장차중조잡개묘면역BALB/c소서,분별우면역후3、6、9화12주,용간접ELISA검측특이성항체적도수평,XTT검측비세포증치반응,류식세포의검측비CD4+T、CD8+T세포아형적비례,ELISA시제합검측세포인자적유생.결과 재면역후3～12주,rBCG-IT조비세포증식반응균명현강우기타각조(P＜0.01),해조IFN-γ유생량급CD4+T세포비례균현저고우rBCG-I조、rBCG-T조급BCG조(P＜0.01).IgG2a/IgG1비치재면역후각시간점적변화추세제시rBCG-IT가유도Th1형세포면역응답.결론 중조역묘rBCG-IT가유도산생교BCG경강、지속시간경장적특이성세포면역응답,가대기면역보호작용진행심입연구.
