基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
1期
82-87
,共6页
罗二梅%张家文%胡笑轲%唐明乔%宇丽
囉二梅%張傢文%鬍笑軻%唐明喬%宇麗
라이매%장가문%호소가%당명교%우려
Transwell小室%人脐带间充质干细胞%兔膝关节软骨细胞%共培养%成软骨诱导
Transwell小室%人臍帶間充質榦細胞%兔膝關節軟骨細胞%共培養%成軟骨誘導
Transwell소실%인제대간충질간세포%토슬관절연골세포%공배양%성연골유도
transwell co-culture system%human umbilical cord mesenchymal stem cells%rabbit knee articular chondrocytes%co-culture%chondrogenic induction
目的 探讨兔膝关节软骨细胞和人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的共培养对hUC-MSCs成软骨诱导分化的影响及共培养的最佳比例.方法 分离培养hUC-MSCs和兔膝关节软骨细胞并鉴定其特异性.在Transwell体系中,按1∶4,1∶3,1∶2,1∶1,2∶1,3∶1及4∶1的比例(hUC-MSCs:兔膝关节软骨细胞)共培养.倒置相差显微镜观察细胞的形态与增殖;甲苯胺蓝染色及免疫荧光染色分别检测葡萄糖胺聚糖(GAG)和Ⅱ型胶原(COL2A1)(蛋白水平定性);并对各组细胞爬片进行GAG、COL2A1定量检测;同时用实时定量荧光PCR(pPCR)检测GAG、COL2A1 mRNA表达,观察共培养前后细胞的基质分泌情况.结果 共培养21 d后,阳性对照组和实验组细胞甲苯胺蓝染色及免疫荧光反应均呈阳性;GAG、COL2A1含量及mRNA表达量1∶4实验组均要高于其他实验组和阳性对照组.结论 hUC-MSCs和兔关节软骨细胞的共培养可明显促进hUC-MSCs向软骨样细胞诱导分化,且最佳共培养比例为1∶4.
目的 探討兔膝關節軟骨細胞和人臍帶間充質榦細胞(hUC-MSCs)的共培養對hUC-MSCs成軟骨誘導分化的影響及共培養的最佳比例.方法 分離培養hUC-MSCs和兔膝關節軟骨細胞併鑒定其特異性.在Transwell體繫中,按1∶4,1∶3,1∶2,1∶1,2∶1,3∶1及4∶1的比例(hUC-MSCs:兔膝關節軟骨細胞)共培養.倒置相差顯微鏡觀察細胞的形態與增殖;甲苯胺藍染色及免疫熒光染色分彆檢測葡萄糖胺聚糖(GAG)和Ⅱ型膠原(COL2A1)(蛋白水平定性);併對各組細胞爬片進行GAG、COL2A1定量檢測;同時用實時定量熒光PCR(pPCR)檢測GAG、COL2A1 mRNA錶達,觀察共培養前後細胞的基質分泌情況.結果 共培養21 d後,暘性對照組和實驗組細胞甲苯胺藍染色及免疫熒光反應均呈暘性;GAG、COL2A1含量及mRNA錶達量1∶4實驗組均要高于其他實驗組和暘性對照組.結論 hUC-MSCs和兔關節軟骨細胞的共培養可明顯促進hUC-MSCs嚮軟骨樣細胞誘導分化,且最佳共培養比例為1∶4.
목적 탐토토슬관절연골세포화인제대간충질간세포(hUC-MSCs)적공배양대hUC-MSCs성연골유도분화적영향급공배양적최가비례.방법 분리배양hUC-MSCs화토슬관절연골세포병감정기특이성.재Transwell체계중,안1∶4,1∶3,1∶2,1∶1,2∶1,3∶1급4∶1적비례(hUC-MSCs:토슬관절연골세포)공배양.도치상차현미경관찰세포적형태여증식;갑분알람염색급면역형광염색분별검측포도당알취당(GAG)화Ⅱ형효원(COL2A1)(단백수평정성);병대각조세포파편진행GAG、COL2A1정량검측;동시용실시정량형광PCR(pPCR)검측GAG、COL2A1 mRNA표체,관찰공배양전후세포적기질분비정황.결과 공배양21 d후,양성대조조화실험조세포갑분알람염색급면역형광반응균정양성;GAG、COL2A1함량급mRNA표체량1∶4실험조균요고우기타실험조화양성대조조.결론 hUC-MSCs화토관절연골세포적공배양가명현촉진hUC-MSCs향연골양세포유도분화,차최가공배양비례위1∶4.
