基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
1期
47-52
,共6页
李琪%李娜%尤列.皮尔曼%维克多.科罗索夫%周向东
李琪%李娜%尤列.皮爾曼%維剋多.科囉索伕%週嚮東
리기%리나%우렬.피이만%유극다.과라색부%주향동
黏蛋白类%分泌%白细胞弹性蛋白酶%Ezrin
黏蛋白類%分泌%白細胞彈性蛋白酶%Ezrin
점단백류%분비%백세포탄성단백매%Ezrin
mucins%secretion%leukocyte elastase%Ezrin
目的 探讨膜连接蛋白Ezrin在中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导气道黏液高分泌的作用及相关调节机制.方法 以中性粒细胞弹性蛋白酶刺激培养的人气道上皮HBE16细胞,ELISA法、real-time PCR法测定黏蛋白(MUC)5AC的蛋白及mRNA水平.免疫荧光法检测Ezrin蛋白含量.结果 NE刺激30 min后MUC5AC mRNA表达增强,细胞中及培养上清中黏蛋白MUC5AC的含量均显著高于对照组(P＜0.01);转染Ezrin永久磷酸化载体pEGFP-N1-Ezrin-T567D的细胞经NE刺激后,胞质内磷酸化Ezrin表达明显增强,且胞膜分布增多.同时,细胞培养上清液中的MUC5AC蛋白含量亦显著高于单纯NE组(P＜0.01).遏制Eznn磷酸化pEGFP-N1-Ezrin-T567A载体转染组在NE刺激后,Ezrin蛋白与pEGFP-N 1-Ezrin-T567D组相比有明显减少,且未出现向胞膜聚集的趋势,同时分泌至培养上清的MUC5AC蛋白也有明显减少(P＜0.01),同时伴随胞质内MUC5AC蛋白有所增加(P＜0.05).结论 Ezrin蛋白参与了NE诱导的MUC5AC蛋白分泌,是气道上皮细胞MUC5AC分泌的重要调控分子.
目的 探討膜連接蛋白Ezrin在中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)誘導氣道黏液高分泌的作用及相關調節機製.方法 以中性粒細胞彈性蛋白酶刺激培養的人氣道上皮HBE16細胞,ELISA法、real-time PCR法測定黏蛋白(MUC)5AC的蛋白及mRNA水平.免疫熒光法檢測Ezrin蛋白含量.結果 NE刺激30 min後MUC5AC mRNA錶達增彊,細胞中及培養上清中黏蛋白MUC5AC的含量均顯著高于對照組(P＜0.01);轉染Ezrin永久燐痠化載體pEGFP-N1-Ezrin-T567D的細胞經NE刺激後,胞質內燐痠化Ezrin錶達明顯增彊,且胞膜分佈增多.同時,細胞培養上清液中的MUC5AC蛋白含量亦顯著高于單純NE組(P＜0.01).遏製Eznn燐痠化pEGFP-N1-Ezrin-T567A載體轉染組在NE刺激後,Ezrin蛋白與pEGFP-N 1-Ezrin-T567D組相比有明顯減少,且未齣現嚮胞膜聚集的趨勢,同時分泌至培養上清的MUC5AC蛋白也有明顯減少(P＜0.01),同時伴隨胞質內MUC5AC蛋白有所增加(P＜0.05).結論 Ezrin蛋白參與瞭NE誘導的MUC5AC蛋白分泌,是氣道上皮細胞MUC5AC分泌的重要調控分子.
목적 탐토막련접단백Ezrin재중성립세포탄성단백매(NE)유도기도점액고분비적작용급상관조절궤제.방법 이중성립세포탄성단백매자격배양적인기도상피HBE16세포,ELISA법、real-time PCR법측정점단백(MUC)5AC적단백급mRNA수평.면역형광법검측Ezrin단백함량.결과 NE자격30 min후MUC5AC mRNA표체증강,세포중급배양상청중점단백MUC5AC적함량균현저고우대조조(P＜0.01);전염Ezrin영구린산화재체pEGFP-N1-Ezrin-T567D적세포경NE자격후,포질내린산화Ezrin표체명현증강,차포막분포증다.동시,세포배양상청액중적MUC5AC단백함량역현저고우단순NE조(P＜0.01).알제Eznn린산화pEGFP-N1-Ezrin-T567A재체전염조재NE자격후,Ezrin단백여pEGFP-N 1-Ezrin-T567D조상비유명현감소,차미출현향포막취집적추세,동시분비지배양상청적MUC5AC단백야유명현감소(P＜0.01),동시반수포질내MUC5AC단백유소증가(P＜0.05).결론 Ezrin단백삼여료NE유도적MUC5AC단백분비,시기도상피세포MUC5AC분비적중요조공분자.
