山西医科大学学报
山西醫科大學學報
산서의과대학학보
JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY
2014年
2期
101-105
,共5页
刘春喜%王仪%郅克谦%王志瑜
劉春喜%王儀%郅剋謙%王誌瑜
류춘희%왕의%질극겸%왕지유
涎腺腺样囊性癌%miR-26a%EZH2%细胞增殖
涎腺腺樣囊性癌%miR-26a%EZH2%細胞增殖
연선선양낭성암%miR-26a%EZH2%세포증식
salivary adenoid cystic carcinoma%miR-26a%EZH2%cell proliferation
目的 探讨miR-26a对涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞增殖能力的影响及其与EZH2的靶向关系. 方法 构建pcD-NATM6.2-pre-miR-26a、pmirGLO-EZH2野生型(pmirGLO-EZH2-WT)和突变型(pmirGLO-EZH2-MT)重组质粒,并采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测pre-miR-26a在ACC-M细胞中的转染效率,并与未处理组(control组)进行比较.同时采用MTT法分析miR-26a过表达对ACC-M细胞增殖活性的影响,并采用双荧光素酶报告基因系统、qRT-PCR和Western blot检测miR-26a与EZH2的靶向关系. 结果 将测序结果采用NCBI BLAST进行序列比对,结果显示pre-miR-26a、EZH2-WT和EZH2-MT重组质粒均构建成功,无碱基缺失或突变.qRT-PCR显示转染pre-miR-26a的ACC-M细胞其miR-26a的表达显著高于未处理组(P＜0.001).MTT分析显示miR-26过表达可以明显抑制ACC-M细胞的增殖活性(P＜0.05).此外,双荧光素酶报告基因系统(P=0.001)、qRT-PCR和Western blot均证实miR-26a能够显著下调EZH2的mRNA(P=0.001)和蛋白的表达(P=0.006). 结论 miR-26a能够显著抑制涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞的增殖活性,并且与EZH2之间存在良好的靶向关系.
目的 探討miR-26a對涎腺腺樣囊性癌ACC-M細胞增殖能力的影響及其與EZH2的靶嚮關繫. 方法 構建pcD-NATM6.2-pre-miR-26a、pmirGLO-EZH2野生型(pmirGLO-EZH2-WT)和突變型(pmirGLO-EZH2-MT)重組質粒,併採用熒光實時定量PCR(qRT-PCR)檢測pre-miR-26a在ACC-M細胞中的轉染效率,併與未處理組(control組)進行比較.同時採用MTT法分析miR-26a過錶達對ACC-M細胞增殖活性的影響,併採用雙熒光素酶報告基因繫統、qRT-PCR和Western blot檢測miR-26a與EZH2的靶嚮關繫. 結果 將測序結果採用NCBI BLAST進行序列比對,結果顯示pre-miR-26a、EZH2-WT和EZH2-MT重組質粒均構建成功,無堿基缺失或突變.qRT-PCR顯示轉染pre-miR-26a的ACC-M細胞其miR-26a的錶達顯著高于未處理組(P＜0.001).MTT分析顯示miR-26過錶達可以明顯抑製ACC-M細胞的增殖活性(P＜0.05).此外,雙熒光素酶報告基因繫統(P=0.001)、qRT-PCR和Western blot均證實miR-26a能夠顯著下調EZH2的mRNA(P=0.001)和蛋白的錶達(P=0.006). 結論 miR-26a能夠顯著抑製涎腺腺樣囊性癌ACC-M細胞的增殖活性,併且與EZH2之間存在良好的靶嚮關繫.
목적 탐토miR-26a대연선선양낭성암ACC-M세포증식능력적영향급기여EZH2적파향관계. 방법 구건pcD-NATM6.2-pre-miR-26a、pmirGLO-EZH2야생형(pmirGLO-EZH2-WT)화돌변형(pmirGLO-EZH2-MT)중조질립,병채용형광실시정량PCR(qRT-PCR)검측pre-miR-26a재ACC-M세포중적전염효솔,병여미처리조(control조)진행비교.동시채용MTT법분석miR-26a과표체대ACC-M세포증식활성적영향,병채용쌍형광소매보고기인계통、qRT-PCR화Western blot검측miR-26a여EZH2적파향관계. 결과 장측서결과채용NCBI BLAST진행서렬비대,결과현시pre-miR-26a、EZH2-WT화EZH2-MT중조질립균구건성공,무감기결실혹돌변.qRT-PCR현시전염pre-miR-26a적ACC-M세포기miR-26a적표체현저고우미처리조(P＜0.001).MTT분석현시miR-26과표체가이명현억제ACC-M세포적증식활성(P＜0.05).차외,쌍형광소매보고기인계통(P=0.001)、qRT-PCR화Western blot균증실miR-26a능구현저하조EZH2적mRNA(P=0.001)화단백적표체(P=0.006). 결론 miR-26a능구현저억제연선선양낭성암ACC-M세포적증식활성,병차여EZH2지간존재량호적파향관계.
