动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2014年
2期
1-5
,共5页
苏春霞%段相国%郑洁%林源%郭琳%陈溥言
囌春霞%段相國%鄭潔%林源%郭琳%陳溥言
소춘하%단상국%정길%림원%곽림%진부언
口蹄疫病毒%重组腺病毒%VP1-2A基因%白细胞介素2
口蹄疫病毒%重組腺病毒%VP1-2A基因%白細胞介素2
구제역병독%중조선병독%VP1-2A기인%백세포개소2
构建共表达口蹄疫病毒(FMDV) VP1-2A基因和猪白细胞介素2(IL-2)基因的重组腺病毒,并研究重组病毒对小鼠特异性免疫的影响.将FMDV VP1-2A基因和猪IL-2基因先后克隆到腺病毒的穿梭载体pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP中,在受体菌中与腺病毒骨架载体pAdenoVatorAE1/E3同源重组.重组腺病毒质粒转染HEK-293A细胞,得到重组腺病毒rAd5VP1-2A-Po IL-2.MTT法检测重组IL-2的生物活性.用rAd5VP1-2A-poIL-2免疫接种小鼠,同时设免疫单独表达FMDV VP1基因的重组腺病毒rAd5VP1和空腺病毒的对照组.通过检测淋巴细胞增殖功能,特异性抗体分泌,IL-4和IFN-γ的表达水平衡量rAd5VP1-2A-poIL-2对小鼠特异性免疫应答的影响.结果显示,成功获得了rAd5VP1-2A-poIL-2,MTT法检测重组IL-2具有生物学活性.小鼠免疫试验结果显示,与rAd5VP1免疫组相比,rAd5VP1-2A-poIL-2免疫既能增强重组病毒诱导小鼠淋巴细胞增殖的能力,又能提高重组病毒诱导小鼠特异性抗体的水平.细胞因子检测结果显示,串联IL-2能促进重组病毒诱导Th1和Th2的分化.研究结果说明,rAd5VP1-2A-poIL-2可望成为口蹄疫的候选疫苗.
構建共錶達口蹄疫病毒(FMDV) VP1-2A基因和豬白細胞介素2(IL-2)基因的重組腺病毒,併研究重組病毒對小鼠特異性免疫的影響.將FMDV VP1-2A基因和豬IL-2基因先後剋隆到腺病毒的穿梭載體pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP中,在受體菌中與腺病毒骨架載體pAdenoVatorAE1/E3同源重組.重組腺病毒質粒轉染HEK-293A細胞,得到重組腺病毒rAd5VP1-2A-Po IL-2.MTT法檢測重組IL-2的生物活性.用rAd5VP1-2A-poIL-2免疫接種小鼠,同時設免疫單獨錶達FMDV VP1基因的重組腺病毒rAd5VP1和空腺病毒的對照組.通過檢測淋巴細胞增殖功能,特異性抗體分泌,IL-4和IFN-γ的錶達水平衡量rAd5VP1-2A-poIL-2對小鼠特異性免疫應答的影響.結果顯示,成功穫得瞭rAd5VP1-2A-poIL-2,MTT法檢測重組IL-2具有生物學活性.小鼠免疫試驗結果顯示,與rAd5VP1免疫組相比,rAd5VP1-2A-poIL-2免疫既能增彊重組病毒誘導小鼠淋巴細胞增殖的能力,又能提高重組病毒誘導小鼠特異性抗體的水平.細胞因子檢測結果顯示,串聯IL-2能促進重組病毒誘導Th1和Th2的分化.研究結果說明,rAd5VP1-2A-poIL-2可望成為口蹄疫的候選疫苗.
구건공표체구제역병독(FMDV) VP1-2A기인화저백세포개소2(IL-2)기인적중조선병독,병연구중조병독대소서특이성면역적영향.장FMDV VP1-2A기인화저IL-2기인선후극륭도선병독적천사재체pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP중,재수체균중여선병독골가재체pAdenoVatorAE1/E3동원중조.중조선병독질립전염HEK-293A세포,득도중조선병독rAd5VP1-2A-Po IL-2.MTT법검측중조IL-2적생물활성.용rAd5VP1-2A-poIL-2면역접충소서,동시설면역단독표체FMDV VP1기인적중조선병독rAd5VP1화공선병독적대조조.통과검측림파세포증식공능,특이성항체분비,IL-4화IFN-γ적표체수평형량rAd5VP1-2A-poIL-2대소서특이성면역응답적영향.결과현시,성공획득료rAd5VP1-2A-poIL-2,MTT법검측중조IL-2구유생물학활성.소서면역시험결과현시,여rAd5VP1면역조상비,rAd5VP1-2A-poIL-2면역기능증강중조병독유도소서림파세포증식적능력,우능제고중조병독유도소서특이성항체적수평.세포인자검측결과현시,천련IL-2능촉진중조병독유도Th1화Th2적분화.연구결과설명,rAd5VP1-2A-poIL-2가망성위구제역적후선역묘.
