基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
2期
235-239
,共5页
潘永平%龚辉%邱梦标%樊晓慧%毛红霞%熊水印%粟庆娟
潘永平%龔輝%邱夢標%樊曉慧%毛紅霞%熊水印%粟慶娟
반영평%공휘%구몽표%번효혜%모홍하%웅수인%속경연
反转录病毒%P27kip1%HepG2%表达
反轉錄病毒%P27kip1%HepG2%錶達
반전록병독%P27kip1%HepG2%표체
retro-virus%P27kip1%HepG2%expression
目的 研究反转录病毒介导的P27kip1基因过表达对HepG2细胞的影响.方法 构建携带有人P27kip1基因的反转录病毒载体,经脂质体介导转染PA317包装细胞,C-418筛选获得稳定产毒细胞系,病毒感染HepG2细胞,筛选出P27kip1阳性克隆,Western blot检测P27kip1在HepG2中的表达,并通过细胞形态学观察、MTT、FCW等方法,检测P27kip1对HepG2细胞的影响.结果 成功构建了含有人P27kip1基因的pLNCX-P27反转录病毒载体并导入包装细胞获得了稳定产毒细胞系,病毒感染HepG2后P27kip1基因可在细胞内高表达,过表达P27kip1基因的细胞生长速度受阻,较多细胞阻滞于G1期,且凋亡增多.结论 构建的pLNCX-P27载体能稳定高效地将P27kip1基因导入HepG2细胞,过表达P27kip1可抑制细胞生长,加速凋亡.
目的 研究反轉錄病毒介導的P27kip1基因過錶達對HepG2細胞的影響.方法 構建攜帶有人P27kip1基因的反轉錄病毒載體,經脂質體介導轉染PA317包裝細胞,C-418篩選穫得穩定產毒細胞繫,病毒感染HepG2細胞,篩選齣P27kip1暘性剋隆,Western blot檢測P27kip1在HepG2中的錶達,併通過細胞形態學觀察、MTT、FCW等方法,檢測P27kip1對HepG2細胞的影響.結果 成功構建瞭含有人P27kip1基因的pLNCX-P27反轉錄病毒載體併導入包裝細胞穫得瞭穩定產毒細胞繫,病毒感染HepG2後P27kip1基因可在細胞內高錶達,過錶達P27kip1基因的細胞生長速度受阻,較多細胞阻滯于G1期,且凋亡增多.結論 構建的pLNCX-P27載體能穩定高效地將P27kip1基因導入HepG2細胞,過錶達P27kip1可抑製細胞生長,加速凋亡.
목적 연구반전록병독개도적P27kip1기인과표체대HepG2세포적영향.방법 구건휴대유인P27kip1기인적반전록병독재체,경지질체개도전염PA317포장세포,C-418사선획득은정산독세포계,병독감염HepG2세포,사선출P27kip1양성극륭,Western blot검측P27kip1재HepG2중적표체,병통과세포형태학관찰、MTT、FCW등방법,검측P27kip1대HepG2세포적영향.결과 성공구건료함유인P27kip1기인적pLNCX-P27반전록병독재체병도입포장세포획득료은정산독세포계,병독감염HepG2후P27kip1기인가재세포내고표체,과표체P27kip1기인적세포생장속도수조,교다세포조체우G1기,차조망증다.결론 구건적pLNCX-P27재체능은정고효지장P27kip1기인도입HepG2세포,과표체P27kip1가억제세포생장,가속조망.
