基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
3期
289-294
,共6页
钟立鹏%郭薇%姚敏%沈婷%杨武%黄春洪
鐘立鵬%郭薇%姚敏%瀋婷%楊武%黃春洪
종립붕%곽미%요민%침정%양무%황춘홍
华游蛇PLIγ%sPLA2%分子对接%炎性反应
華遊蛇PLIγ%sPLA2%分子對接%炎性反應
화유사PLIγ%sPLA2%분자대접%염성반응
sinonatrix percarinata PLIγ%sPLA2%molecular docking%inflammatory
目的 设计华游蛇血清PLIγ模拟肽并研究其对PLA2抑制作用.方法 用RT-PCR方法克隆华游蛇PLIγ基因并测序进行序列比对.基于华游蛇PLIγ序列设计一个长度为19个氨基酸的多肽.利用Auto dock分子对接分析该19肽与sPLA2相互作用,运用琼脂糖平板法验证其对sPLA2的抑制效果,并通过小鼠实验进一步检测其抗sPLA2出血毒性.利用LPS诱导小鼠Raw264.7细胞炎性反应,检测细胞花生四烯酸含量以评价19肽对细胞sPLA2酶活性抑制作用.结果 设计得到的华游蛇PLIγ模拟肽序列为PGLPLSYPNGGGGSVAFRS.该19肽较好地抑制蛇毒PLA2酶活性和出血毒性,并可以显著减少LPS诱导Raw264.7炎性细胞中花生四烯酸含量,IC50为86.3μmol/L.结论 本文设计的华游蛇PLIγ模拟肽,具备了天然PLIγ的活性,具有抗细胞炎性反应和蛇毒出血毒作用.
目的 設計華遊蛇血清PLIγ模擬肽併研究其對PLA2抑製作用.方法 用RT-PCR方法剋隆華遊蛇PLIγ基因併測序進行序列比對.基于華遊蛇PLIγ序列設計一箇長度為19箇氨基痠的多肽.利用Auto dock分子對接分析該19肽與sPLA2相互作用,運用瓊脂糖平闆法驗證其對sPLA2的抑製效果,併通過小鼠實驗進一步檢測其抗sPLA2齣血毒性.利用LPS誘導小鼠Raw264.7細胞炎性反應,檢測細胞花生四烯痠含量以評價19肽對細胞sPLA2酶活性抑製作用.結果 設計得到的華遊蛇PLIγ模擬肽序列為PGLPLSYPNGGGGSVAFRS.該19肽較好地抑製蛇毒PLA2酶活性和齣血毒性,併可以顯著減少LPS誘導Raw264.7炎性細胞中花生四烯痠含量,IC50為86.3μmol/L.結論 本文設計的華遊蛇PLIγ模擬肽,具備瞭天然PLIγ的活性,具有抗細胞炎性反應和蛇毒齣血毒作用.
목적 설계화유사혈청PLIγ모의태병연구기대PLA2억제작용.방법 용RT-PCR방법극륭화유사PLIγ기인병측서진행서렬비대.기우화유사PLIγ서렬설계일개장도위19개안기산적다태.이용Auto dock분자대접분석해19태여sPLA2상호작용,운용경지당평판법험증기대sPLA2적억제효과,병통과소서실험진일보검측기항sPLA2출혈독성.이용LPS유도소서Raw264.7세포염성반응,검측세포화생사희산함량이평개19태대세포sPLA2매활성억제작용.결과 설계득도적화유사PLIγ모의태서렬위PGLPLSYPNGGGGSVAFRS.해19태교호지억제사독PLA2매활성화출혈독성,병가이현저감소LPS유도Raw264.7염성세포중화생사희산함량,IC50위86.3μmol/L.결론 본문설계적화유사PLIγ모의태,구비료천연PLIγ적활성,구유항세포염성반응화사독출혈독작용.
