畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2013年
12期
1976-1981
,共6页
王蓓%刘芳%王汉清%李宁%魏建忠%刘光清%王桂军
王蓓%劉芳%王漢清%李寧%魏建忠%劉光清%王桂軍
왕배%류방%왕한청%리저%위건충%류광청%왕계군
J亚群禽白血病病毒%AH-J11株%全基因组%感染性克隆%病毒拯救
J亞群禽白血病病毒%AH-J11株%全基因組%感染性剋隆%病毒拯救
J아군금백혈병병독%AH-J11주%전기인조%감염성극륭%병독증구
subgroup J avian leukosis virus(ALV-J)%AH-J11 strain%genome%infectious molecular clone%virus rescue
为探究鸡J亚群禽白血病病毒(ALV J)的致病机理,采用PCR方法分4段分别扩增出J亚群禽白血病病毒安徽分离株AH-J11的前病毒cDNA,PCR产物经克隆鉴定,酶切后顺次连接,获得含有完整ALV-J AH-J11株前病毒cDNA的重组质粒,命名为pSK-AH-J 11.将AH J11株全基因序列克隆至pBluescriptⅡSK(+)载体中,得到重组质粒pBl-A H-J 11,并将其转染鸡胚成纤维细胞(CEF).通过间接免疫荧光试验,RT-PCR和Western blot检测,并经测序验证比对拯救前后病毒的gp85基因序列,结果均表明拯救出了1株重组J亚群禽白血病病毒(rALV-J).本研究成功构建了鸡ALV-J的感染性克隆并救获了其重组病毒,为研究禽白血病的致病机理提供了良好的反向遗传操作技术平台.
為探究鷄J亞群禽白血病病毒(ALV J)的緻病機理,採用PCR方法分4段分彆擴增齣J亞群禽白血病病毒安徽分離株AH-J11的前病毒cDNA,PCR產物經剋隆鑒定,酶切後順次連接,穫得含有完整ALV-J AH-J11株前病毒cDNA的重組質粒,命名為pSK-AH-J 11.將AH J11株全基因序列剋隆至pBluescriptⅡSK(+)載體中,得到重組質粒pBl-A H-J 11,併將其轉染鷄胚成纖維細胞(CEF).通過間接免疫熒光試驗,RT-PCR和Western blot檢測,併經測序驗證比對拯救前後病毒的gp85基因序列,結果均錶明拯救齣瞭1株重組J亞群禽白血病病毒(rALV-J).本研究成功構建瞭鷄ALV-J的感染性剋隆併救穫瞭其重組病毒,為研究禽白血病的緻病機理提供瞭良好的反嚮遺傳操作技術平檯.
위탐구계J아군금백혈병병독(ALV J)적치병궤리,채용PCR방법분4단분별확증출J아군금백혈병병독안휘분리주AH-J11적전병독cDNA,PCR산물경극륭감정,매절후순차련접,획득함유완정ALV-J AH-J11주전병독cDNA적중조질립,명명위pSK-AH-J 11.장AH J11주전기인서렬극륭지pBluescriptⅡSK(+)재체중,득도중조질립pBl-A H-J 11,병장기전염계배성섬유세포(CEF).통과간접면역형광시험,RT-PCR화Western blot검측,병경측서험증비대증구전후병독적gp85기인서렬,결과균표명증구출료1주중조J아군금백혈병병독(rALV-J).본연구성공구건료계ALV-J적감염성극륭병구획료기중조병독,위연구금백혈병적치병궤리제공료량호적반향유전조작기술평태.
