临床与实验病理学杂志
臨床與實驗病理學雜誌
림상여실험병이학잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL PATHOLOGY
2013年
12期
1288-1293
,共6页
苏传丽%罗殿中%陈罡%覃新干
囌傳麗%囉殿中%陳罡%覃新榦
소전려%라전중%진강%담신간
肝肿瘤%RNAi%DcR3%增殖%凋亡%迁移
肝腫瘤%RNAi%DcR3%增殖%凋亡%遷移
간종류%RNAi%DcR3%증식%조망%천이
目的 探讨特异性诱捕受体3(decoy receptor 3,DcR3)的siRNA对HepG2细胞生物学特性的影响.方法 设计并合成针对DcR3的siRNA,用脂质体转染HepG2细胞,通过半定量RT-PCR及免疫细胞化学法检测其对DcR3表达的抑制作用;应用MTT法、流式细胞术、划痕实验检测转染后HepG2细胞增殖、凋亡及迁移能力的变化.结果特异性DcR3-siRNA能抑制DcR3 mRNA和蛋白表达(P<0.05);MTT实验结果:转染后24、48和72 h特异性DcR3-siRNA转染组细胞吸光度值低于空白对照组、脂质体转染组及非特异性siRNA转染组(P<0.001),特异性DcR3-siRNA转染组细胞的增殖抑制率在24、48和72 h分别为20.71%、35.00%和34.04%;转染后72 h,特异性DcR3-siRNA转染组细胞与空白对照组、脂质体转染组及非特异性siRNA转染组细胞相比,G1期细胞比例增多而G2/M期细胞比例减少(P<0.01);流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示,特异性DcR3-siRNA转染组细胞凋亡率(22.97%±2.10%)高于空白对照组(1.17%±0.32%)、脂质体转染组(1.44%±0.43%)及非特异性siRNA转染组(1.22%±0.40%)(P<0.001);划痕实验结果显示,转染后24、48和72 h,特异性DcR3-siRNA转染组细胞的相对迁移率均低于空白对照组、脂质体转染组及非特异性siRNA转染组细胞(P<0.001).结论 特异性DcR3-siRNA能有效抑制肝癌细胞系HepG2的DcR3表达,诱导细胞凋亡,并能抑制HepG2细胞的增殖和迁移能力.
目的 探討特異性誘捕受體3(decoy receptor 3,DcR3)的siRNA對HepG2細胞生物學特性的影響.方法 設計併閤成針對DcR3的siRNA,用脂質體轉染HepG2細胞,通過半定量RT-PCR及免疫細胞化學法檢測其對DcR3錶達的抑製作用;應用MTT法、流式細胞術、劃痕實驗檢測轉染後HepG2細胞增殖、凋亡及遷移能力的變化.結果特異性DcR3-siRNA能抑製DcR3 mRNA和蛋白錶達(P<0.05);MTT實驗結果:轉染後24、48和72 h特異性DcR3-siRNA轉染組細胞吸光度值低于空白對照組、脂質體轉染組及非特異性siRNA轉染組(P<0.001),特異性DcR3-siRNA轉染組細胞的增殖抑製率在24、48和72 h分彆為20.71%、35.00%和34.04%;轉染後72 h,特異性DcR3-siRNA轉染組細胞與空白對照組、脂質體轉染組及非特異性siRNA轉染組細胞相比,G1期細胞比例增多而G2/M期細胞比例減少(P<0.01);流式細胞儀檢測細胞凋亡結果顯示,特異性DcR3-siRNA轉染組細胞凋亡率(22.97%±2.10%)高于空白對照組(1.17%±0.32%)、脂質體轉染組(1.44%±0.43%)及非特異性siRNA轉染組(1.22%±0.40%)(P<0.001);劃痕實驗結果顯示,轉染後24、48和72 h,特異性DcR3-siRNA轉染組細胞的相對遷移率均低于空白對照組、脂質體轉染組及非特異性siRNA轉染組細胞(P<0.001).結論 特異性DcR3-siRNA能有效抑製肝癌細胞繫HepG2的DcR3錶達,誘導細胞凋亡,併能抑製HepG2細胞的增殖和遷移能力.
목적 탐토특이성유포수체3(decoy receptor 3,DcR3)적siRNA대HepG2세포생물학특성적영향.방법 설계병합성침대DcR3적siRNA,용지질체전염HepG2세포,통과반정량RT-PCR급면역세포화학법검측기대DcR3표체적억제작용;응용MTT법、류식세포술、화흔실험검측전염후HepG2세포증식、조망급천이능력적변화.결과특이성DcR3-siRNA능억제DcR3 mRNA화단백표체(P<0.05);MTT실험결과:전염후24、48화72 h특이성DcR3-siRNA전염조세포흡광도치저우공백대조조、지질체전염조급비특이성siRNA전염조(P<0.001),특이성DcR3-siRNA전염조세포적증식억제솔재24、48화72 h분별위20.71%、35.00%화34.04%;전염후72 h,특이성DcR3-siRNA전염조세포여공백대조조、지질체전염조급비특이성siRNA전염조세포상비,G1기세포비례증다이G2/M기세포비례감소(P<0.01);류식세포의검측세포조망결과현시,특이성DcR3-siRNA전염조세포조망솔(22.97%±2.10%)고우공백대조조(1.17%±0.32%)、지질체전염조(1.44%±0.43%)급비특이성siRNA전염조(1.22%±0.40%)(P<0.001);화흔실험결과현시,전염후24、48화72 h,특이성DcR3-siRNA전염조세포적상대천이솔균저우공백대조조、지질체전염조급비특이성siRNA전염조세포(P<0.001).결론 특이성DcR3-siRNA능유효억제간암세포계HepG2적DcR3표체,유도세포조망,병능억제HepG2세포적증식화천이능력.
