中华肺部疾病杂志（电子版）
中華肺部疾病雜誌（電子版）
중화폐부질병잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF LUNG DISEASE（ELECTRONIC EDITION）
2013年
6期
4-8
,共5页
胡明冬%夏世金%吴俊珍%孙涛%吴金峰%彭正羽%钱桂生
鬍明鼕%夏世金%吳俊珍%孫濤%吳金峰%彭正羽%錢桂生
호명동%하세금%오준진%손도%오금봉%팽정우%전계생
Gax基因%低氧%肺动脉高压%内皮细胞%增殖%低氧诱导因子-1α
Gax基因%低氧%肺動脈高壓%內皮細胞%增殖%低氧誘導因子-1α
Gax기인%저양%폐동맥고압%내피세포%증식%저양유도인자-1α
Gax gene%Hypoxia%Pulmonary arterial hypertension%Endothelial cell%Proliferation%Hypoxia-inducible fator-1 α
目的 观察Gax基因对低氧性肺动脉内皮细胞(PAECs)增殖和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因表达的影响,为进一步研究Gax基因调节低氧性肺动脉高压(HPH)的作用与机制奠定基础.方法 取大鼠肺动脉,用酶消化法获取PAECs并进行原代培养;PAECs分4组:未转染常氧对照组(常氧组)、未转染低氧处理组(低氧组)、Ad-βGal转染再行低氧处理组(Ad-βGal+低氧组)、Ad-Gax转染再行低氧处理组(Ad-Gax+低氧组).分别在常氧(21％ O2)和低氧(2.5％ O2)1 h、3h、6h和12 h各时相点,采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测PAECs增殖;使用RT-PCR和Weatem blot方法分别检测PAECs中HIF-1αmRNA和蛋白表达水平.结果 ①PAECs的3H-TdR掺入量:与常氧组同时相点比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组均显著升高(P均＜0.01),在低氧6h达最大值;Ad-Gax+低氧组与常氧组同时相点比较均显著升高(P均＜0.01),但与低氧组比较却均明显降低(P＜0.01、P＜0.05),到低氧6h降幅最大;②在低氧处理6h,与常氧组比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组HIF-1α mRNA和蛋白表达均明显上调;与低氧组或Ad-βGal+低氧组比较,Ad-Gax+低氧组HIF-1α mRNA和蛋白表达皆显著下调,差异有统计学意义(P＜0.05、P＜0.01).低氧早期内皮细胞异常增殖加速,而此时增强Gax基因的表达可抑制细胞的异常增殖;随着低氧时间的不断延长,细胞增殖受到抑制,而此时增强内皮细胞中Gax基因表达却又促进细胞增殖,以此来维持细胞的数量.结论 Gax基因对维持内皮细胞数量的稳态具有双向调节作用.增强Gax基因的表达能下调低氧诱导的HIF-1α mRNA和蛋白表达,这可能与Gax基因抑制低氧性内皮细胞异常增殖的机制相关.
目的 觀察Gax基因對低氧性肺動脈內皮細胞(PAECs)增殖和低氧誘導因子-1α(HIF-1α)基因錶達的影響,為進一步研究Gax基因調節低氧性肺動脈高壓(HPH)的作用與機製奠定基礎.方法 取大鼠肺動脈,用酶消化法穫取PAECs併進行原代培養;PAECs分4組:未轉染常氧對照組(常氧組)、未轉染低氧處理組(低氧組)、Ad-βGal轉染再行低氧處理組(Ad-βGal+低氧組)、Ad-Gax轉染再行低氧處理組(Ad-Gax+低氧組).分彆在常氧(21％ O2)和低氧(2.5％ O2)1 h、3h、6h和12 h各時相點,採用3H-胸腺嘧啶覈苷(3H-TdR)摻入法檢測PAECs增殖;使用RT-PCR和Weatem blot方法分彆檢測PAECs中HIF-1αmRNA和蛋白錶達水平.結果 ①PAECs的3H-TdR摻入量:與常氧組同時相點比較,低氧組和Ad-βGal+低氧組均顯著升高(P均＜0.01),在低氧6h達最大值;Ad-Gax+低氧組與常氧組同時相點比較均顯著升高(P均＜0.01),但與低氧組比較卻均明顯降低(P＜0.01、P＜0.05),到低氧6h降幅最大;②在低氧處理6h,與常氧組比較,低氧組和Ad-βGal+低氧組HIF-1α mRNA和蛋白錶達均明顯上調;與低氧組或Ad-βGal+低氧組比較,Ad-Gax+低氧組HIF-1α mRNA和蛋白錶達皆顯著下調,差異有統計學意義(P＜0.05、P＜0.01).低氧早期內皮細胞異常增殖加速,而此時增彊Gax基因的錶達可抑製細胞的異常增殖;隨著低氧時間的不斷延長,細胞增殖受到抑製,而此時增彊內皮細胞中Gax基因錶達卻又促進細胞增殖,以此來維持細胞的數量.結論 Gax基因對維持內皮細胞數量的穩態具有雙嚮調節作用.增彊Gax基因的錶達能下調低氧誘導的HIF-1α mRNA和蛋白錶達,這可能與Gax基因抑製低氧性內皮細胞異常增殖的機製相關.
목적 관찰Gax기인대저양성폐동맥내피세포(PAECs)증식화저양유도인자-1α(HIF-1α)기인표체적영향,위진일보연구Gax기인조절저양성폐동맥고압(HPH)적작용여궤제전정기출.방법 취대서폐동맥,용매소화법획취PAECs병진행원대배양;PAECs분4조:미전염상양대조조(상양조)、미전염저양처리조(저양조)、Ad-βGal전염재행저양처리조(Ad-βGal+저양조)、Ad-Gax전염재행저양처리조(Ad-Gax+저양조).분별재상양(21％ O2)화저양(2.5％ O2)1 h、3h、6h화12 h각시상점,채용3H-흉선밀정핵감(3H-TdR)참입법검측PAECs증식;사용RT-PCR화Weatem blot방법분별검측PAECs중HIF-1αmRNA화단백표체수평.결과 ①PAECs적3H-TdR참입량:여상양조동시상점비교,저양조화Ad-βGal+저양조균현저승고(P균＜0.01),재저양6h체최대치;Ad-Gax+저양조여상양조동시상점비교균현저승고(P균＜0.01),단여저양조비교각균명현강저(P＜0.01、P＜0.05),도저양6h강폭최대;②재저양처리6h,여상양조비교,저양조화Ad-βGal+저양조HIF-1α mRNA화단백표체균명현상조;여저양조혹Ad-βGal+저양조비교,Ad-Gax+저양조HIF-1α mRNA화단백표체개현저하조,차이유통계학의의(P＜0.05、P＜0.01).저양조기내피세포이상증식가속,이차시증강Gax기인적표체가억제세포적이상증식;수착저양시간적불단연장,세포증식수도억제,이차시증강내피세포중Gax기인표체각우촉진세포증식,이차래유지세포적수량.결론 Gax기인대유지내피세포수량적은태구유쌍향조절작용.증강Gax기인적표체능하조저양유도적HIF-1α mRNA화단백표체,저가능여Gax기인억제저양성내피세포이상증식적궤제상관.
