检验医学与临床
檢驗醫學與臨床
검험의학여림상
JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE AND CLINICAL SCIENCES
2014年
3期
334-336
,共3页
钟丹%薛群%王淑一
鐘丹%薛群%王淑一
종단%설군%왕숙일
基因分型%人类乳头瘤病毒%一管式多引物测序法%焦磷酸测序
基因分型%人類乳頭瘤病毒%一管式多引物測序法%焦燐痠測序
기인분형%인류유두류병독%일관식다인물측서법%초린산측서
genotyping%human papillomaviruses,HPV%multiple sequencing primers method%pyrose-quencing
目的:探讨一管式多引物焦磷酸测序技术在人类乳头瘤病毒(HPV )分型检测中的临床应用价值。方法设计针对7个不同 HPV亚型的高度特异性测序引物,采用一管式多引物测序法,通过半巢式聚合酶链反应(PCR)扩增获得 HPV基因片段,并进行焦磷酸测序分析。结果通过半巢式PCR扩增和一管式多引物焦磷酸测序,成功区分了7种不同的 HPV亚型,且测序结果与PCR-反向点杂交法检测结果的符合率是100%。结论一管式多引物焦磷酸测序技术是一种简便、高效、高通量、高灵敏度、高准确度的HPV分型检测方法,值得推广应用。
目的:探討一管式多引物焦燐痠測序技術在人類乳頭瘤病毒(HPV )分型檢測中的臨床應用價值。方法設計針對7箇不同 HPV亞型的高度特異性測序引物,採用一管式多引物測序法,通過半巢式聚閤酶鏈反應(PCR)擴增穫得 HPV基因片段,併進行焦燐痠測序分析。結果通過半巢式PCR擴增和一管式多引物焦燐痠測序,成功區分瞭7種不同的 HPV亞型,且測序結果與PCR-反嚮點雜交法檢測結果的符閤率是100%。結論一管式多引物焦燐痠測序技術是一種簡便、高效、高通量、高靈敏度、高準確度的HPV分型檢測方法,值得推廣應用。
목적:탐토일관식다인물초린산측서기술재인류유두류병독(HPV )분형검측중적림상응용개치。방법설계침대7개불동 HPV아형적고도특이성측서인물,채용일관식다인물측서법,통과반소식취합매련반응(PCR)확증획득 HPV기인편단,병진행초린산측서분석。결과통과반소식PCR확증화일관식다인물초린산측서,성공구분료7충불동적 HPV아형,차측서결과여PCR-반향점잡교법검측결과적부합솔시100%。결론일관식다인물초린산측서기술시일충간편、고효、고통량、고령민도、고준학도적HPV분형검측방법,치득추엄응용。
Objective To investigate the significance of pyrosequencing in the genotyping of human papilloma-viruses (HPV) .Methods Seven highly specific sequencing primers for HPV subtypes were designed and used to am-plify HPV DNA fragments by semi-nested polymerase chain reaction (PCR) .Then ,the PCR products were se-quenced by pyrosequencing .Results Seven different HPV subtypes were successfully identified by semi-nested PCR and pyrosequencing with seven sequencing primers mixed in one well .Conclusion Pyrosequencing using multi-prim-ers mixed in one well could be an efficient way to detect different HPV subtypes .