中国现代普通外科进展
中國現代普通外科進展
중국현대보통외과진전
CHINESE JOURNAL OF CURRENT ADVANCES IN GENERAL SURGERY
2013年
12期
931-934
,共4页
丁治国%何蓓%陈晓珩%汪唐顺%高翔%李乃卿
丁治國%何蓓%陳曉珩%汪唐順%高翔%李迺卿
정치국%하배%진효형%왕당순%고상%리내경
肝肿瘤%MHCC97L 细胞%STAT1基因%慢病毒载体
肝腫瘤%MHCC97L 細胞%STAT1基因%慢病毒載體
간종류%MHCC97L 세포%STAT1기인%만병독재체
Liver neoplasms%MHCC97L cells%STAT1 gene%Lentivirus vector
目的:构建STAT1基因过表达慢病毒载体并实现其在人肝癌细胞MHCC97L中的表达.方法:根据人STAT1基因mRNA序列,全基因合成STAT1基因,构建至过表达载体并转化至感受态细胞DH5α,进行测序验证.在脂质体介导下转染293T细胞,包装生产幔病毒.慢病毒载体转染人肝癌细胞MHCC97L,用荧光定量PCR和Western blot检测原始细胞株(MHCC97L),稳转细胞株(MHCC97-stat1)中STAT1的表达情况,确定STAT1过表达的有效性.结果:测序证实STAT1基因过表达载体构建成功.过表达慢病毒包装成功.慢病毒转染人肝癌细胞MHCC97L 48 h后,STAT1基因在mRNA水平和蛋白质水平上表达显著增加.结论:STAT1基因过表达慢病毒载体构建成功,并实现其在人肝癌细胞MHCC97L中的表达.
目的:構建STAT1基因過錶達慢病毒載體併實現其在人肝癌細胞MHCC97L中的錶達.方法:根據人STAT1基因mRNA序列,全基因閤成STAT1基因,構建至過錶達載體併轉化至感受態細胞DH5α,進行測序驗證.在脂質體介導下轉染293T細胞,包裝生產幔病毒.慢病毒載體轉染人肝癌細胞MHCC97L,用熒光定量PCR和Western blot檢測原始細胞株(MHCC97L),穩轉細胞株(MHCC97-stat1)中STAT1的錶達情況,確定STAT1過錶達的有效性.結果:測序證實STAT1基因過錶達載體構建成功.過錶達慢病毒包裝成功.慢病毒轉染人肝癌細胞MHCC97L 48 h後,STAT1基因在mRNA水平和蛋白質水平上錶達顯著增加.結論:STAT1基因過錶達慢病毒載體構建成功,併實現其在人肝癌細胞MHCC97L中的錶達.
목적:구건STAT1기인과표체만병독재체병실현기재인간암세포MHCC97L중적표체.방법:근거인STAT1기인mRNA서렬,전기인합성STAT1기인,구건지과표체재체병전화지감수태세포DH5α,진행측서험증.재지질체개도하전염293T세포,포장생산만병독.만병독재체전염인간암세포MHCC97L,용형광정량PCR화Western blot검측원시세포주(MHCC97L),은전세포주(MHCC97-stat1)중STAT1적표체정황,학정STAT1과표체적유효성.결과:측서증실STAT1기인과표체재체구건성공.과표체만병독포장성공.만병독전염인간암세포MHCC97L 48 h후,STAT1기인재mRNA수평화단백질수평상표체현저증가.결론:STAT1기인과표체만병독재체구건성공,병실현기재인간암세포MHCC97L중적표체.