胃肠病学和肝病学杂志
胃腸病學和肝病學雜誌
위장병학화간병학잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY
2014年
1期
81-84
,共4页
APOBEC3F%真核表达%乙型肝炎病毒
APOBEC3F%真覈錶達%乙型肝炎病毒
APOBEC3F%진핵표체%을형간염병독
目的 比较APOBEC3F剪接亚型3F79与完整APOBEC3F以及APOBEC3G对HepG2.2.15细胞中HBV DNA复制及HBsAg、HBeAg抗原分泌的影响.方法 用PCR合成法扩增人APOBEC3F剪接亚型3F79,构建真核表达载体pEGFPC1-3F79和原核表达质粒pET28a-3F79,将pEGFPC1-3F79与含有全长APOBEC3F和APOBEC3G的质粒Pflag-APOBEC3F、PC-APOBEC3G-HA转染入HepG2.2.15中,检测转染后细胞上清中HBV DNA以及HBsAg和HBeAg的水平.结果 构建的重组载体经酶切和PCR鉴定,表明3F79基因正确地插入.将pEGFPC1-3F79与Pflag-APOBEC3F、PC-APOBEC3G-HA转染HepG2.2.15细胞后,pEGFPC1-3F79对细胞中HBV的复制及HBsAg和HBeAg的分泌无明显的抑制作用(P>0.05),而转染含有完整APOBEC3F 和APOBEC3G质粒的HepG2.2.15细胞与对照组相比,HBsAg、HBeAg、HBV DNA含量明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 3F79不能像完整APOBEC3F和APOBEC3G一样抑制HepG2.2.15细胞中HBV DNA复制以及抗原的分泌.
目的 比較APOBEC3F剪接亞型3F79與完整APOBEC3F以及APOBEC3G對HepG2.2.15細胞中HBV DNA複製及HBsAg、HBeAg抗原分泌的影響.方法 用PCR閤成法擴增人APOBEC3F剪接亞型3F79,構建真覈錶達載體pEGFPC1-3F79和原覈錶達質粒pET28a-3F79,將pEGFPC1-3F79與含有全長APOBEC3F和APOBEC3G的質粒Pflag-APOBEC3F、PC-APOBEC3G-HA轉染入HepG2.2.15中,檢測轉染後細胞上清中HBV DNA以及HBsAg和HBeAg的水平.結果 構建的重組載體經酶切和PCR鑒定,錶明3F79基因正確地插入.將pEGFPC1-3F79與Pflag-APOBEC3F、PC-APOBEC3G-HA轉染HepG2.2.15細胞後,pEGFPC1-3F79對細胞中HBV的複製及HBsAg和HBeAg的分泌無明顯的抑製作用(P>0.05),而轉染含有完整APOBEC3F 和APOBEC3G質粒的HepG2.2.15細胞與對照組相比,HBsAg、HBeAg、HBV DNA含量明顯下降,差異有統計學意義(P<0.05).結論 3F79不能像完整APOBEC3F和APOBEC3G一樣抑製HepG2.2.15細胞中HBV DNA複製以及抗原的分泌.
목적 비교APOBEC3F전접아형3F79여완정APOBEC3F이급APOBEC3G대HepG2.2.15세포중HBV DNA복제급HBsAg、HBeAg항원분비적영향.방법 용PCR합성법확증인APOBEC3F전접아형3F79,구건진핵표체재체pEGFPC1-3F79화원핵표체질립pET28a-3F79,장pEGFPC1-3F79여함유전장APOBEC3F화APOBEC3G적질립Pflag-APOBEC3F、PC-APOBEC3G-HA전염입HepG2.2.15중,검측전염후세포상청중HBV DNA이급HBsAg화HBeAg적수평.결과 구건적중조재체경매절화PCR감정,표명3F79기인정학지삽입.장pEGFPC1-3F79여Pflag-APOBEC3F、PC-APOBEC3G-HA전염HepG2.2.15세포후,pEGFPC1-3F79대세포중HBV적복제급HBsAg화HBeAg적분비무명현적억제작용(P>0.05),이전염함유완정APOBEC3F 화APOBEC3G질립적HepG2.2.15세포여대조조상비,HBsAg、HBeAg、HBV DNA함량명현하강,차이유통계학의의(P<0.05).결론 3F79불능상완정APOBEC3F화APOBEC3G일양억제HepG2.2.15세포중HBV DNA복제이급항원적분비.
