解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2013年
6期
767-771
,共5页
邹琳清%金国华%王海琴%李浩明%朱培培%秦建兵
鄒琳清%金國華%王海琴%李浩明%硃培培%秦建兵
추림청%금국화%왕해금%리호명%주배배%진건병
RUNX1T1%海马%穹隆海马伞切割%神经再生%免疫荧光%大鼠
RUNX1T1%海馬%穹隆海馬傘切割%神經再生%免疫熒光%大鼠
RUNX1T1%해마%궁륭해마산절할%신경재생%면역형광%대서
RUNX1T1%Hippocampus%Fimbria/fornix transection%Neural regeneration%Immunofluorescence%Rat
目的 观察穹隆海马伞切割后不同时间点海马内RUNX1T1 mRNA和蛋白的表达变化及定位.方法 行穹隆海马伞切割术,制备模型大鼠.实验分为正常组、切割3d组、切割7d组、切割14d组、切割21d组、切割28d组.1.提取海马组织总mRNA,用Real-time PCR检测大鼠海马组织中RUNX1T1mRNA的表达;2.提取海马组织总蛋白,用Western blotting检测海马内RUNX1 T1蛋白的表达;3.行脑冷冻切片,行RUNX1T1免疫荧光检测和Hoechst标记,观察海马齿状回中RUNX1T1/Hoechst双标阳性细胞.结果 Real-time PCR检测显示,切割3d组海马组织中RUNX1T1 mRNA的表达明显上调,其余各组差异不明显;Western blotting检测结果显示,正常组海马中有微量RUNX1T1蛋白表达,而切割3d组海马组织中RUNX1T1蛋白表达量明显上升,并达到高峰,7d时仍有较多的表达,此后,14d、21d、28d组中RUNX1T1蛋白表达很快又恢复到正常水平;免疫荧光检测结果表明,正常组海马齿状回中有少量的RUNX1T1/Hoechst阳性细胞,切割3d组海马齿状回中RUNX1T1/Hoechst阳性细胞数量最多,切割7d组逐渐减少,切割14d组、21d组和28d组与正常组差别不明显.结论 穹隆海马伞切割后海马内RUNX1T1mRNA和蛋白表达在早期呈短暂性上调,并定位于海马齿状回颗粒下层,推测可能与海马神经再生过程中神经干细胞向神经元分化有关.
目的 觀察穹隆海馬傘切割後不同時間點海馬內RUNX1T1 mRNA和蛋白的錶達變化及定位.方法 行穹隆海馬傘切割術,製備模型大鼠.實驗分為正常組、切割3d組、切割7d組、切割14d組、切割21d組、切割28d組.1.提取海馬組織總mRNA,用Real-time PCR檢測大鼠海馬組織中RUNX1T1mRNA的錶達;2.提取海馬組織總蛋白,用Western blotting檢測海馬內RUNX1 T1蛋白的錶達;3.行腦冷凍切片,行RUNX1T1免疫熒光檢測和Hoechst標記,觀察海馬齒狀迴中RUNX1T1/Hoechst雙標暘性細胞.結果 Real-time PCR檢測顯示,切割3d組海馬組織中RUNX1T1 mRNA的錶達明顯上調,其餘各組差異不明顯;Western blotting檢測結果顯示,正常組海馬中有微量RUNX1T1蛋白錶達,而切割3d組海馬組織中RUNX1T1蛋白錶達量明顯上升,併達到高峰,7d時仍有較多的錶達,此後,14d、21d、28d組中RUNX1T1蛋白錶達很快又恢複到正常水平;免疫熒光檢測結果錶明,正常組海馬齒狀迴中有少量的RUNX1T1/Hoechst暘性細胞,切割3d組海馬齒狀迴中RUNX1T1/Hoechst暘性細胞數量最多,切割7d組逐漸減少,切割14d組、21d組和28d組與正常組差彆不明顯.結論 穹隆海馬傘切割後海馬內RUNX1T1mRNA和蛋白錶達在早期呈短暫性上調,併定位于海馬齒狀迴顆粒下層,推測可能與海馬神經再生過程中神經榦細胞嚮神經元分化有關.
목적 관찰궁륭해마산절할후불동시간점해마내RUNX1T1 mRNA화단백적표체변화급정위.방법 행궁륭해마산절할술,제비모형대서.실험분위정상조、절할3d조、절할7d조、절할14d조、절할21d조、절할28d조.1.제취해마조직총mRNA,용Real-time PCR검측대서해마조직중RUNX1T1mRNA적표체;2.제취해마조직총단백,용Western blotting검측해마내RUNX1 T1단백적표체;3.행뇌냉동절편,행RUNX1T1면역형광검측화Hoechst표기,관찰해마치상회중RUNX1T1/Hoechst쌍표양성세포.결과 Real-time PCR검측현시,절할3d조해마조직중RUNX1T1 mRNA적표체명현상조,기여각조차이불명현;Western blotting검측결과현시,정상조해마중유미량RUNX1T1단백표체,이절할3d조해마조직중RUNX1T1단백표체량명현상승,병체도고봉,7d시잉유교다적표체,차후,14d、21d、28d조중RUNX1T1단백표체흔쾌우회복도정상수평;면역형광검측결과표명,정상조해마치상회중유소량적RUNX1T1/Hoechst양성세포,절할3d조해마치상회중RUNX1T1/Hoechst양성세포수량최다,절할7d조축점감소,절할14d조、21d조화28d조여정상조차별불명현.결론 궁륭해마산절할후해마내RUNX1T1mRNA화단백표체재조기정단잠성상조,병정위우해마치상회과립하층,추측가능여해마신경재생과정중신경간세포향신경원분화유관.