解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2013年
6期
748-755
,共8页
赵静雅%鲁广秀%徐高磊%邓锦波
趙靜雅%魯廣秀%徐高磊%鄧錦波
조정아%로엄수%서고뢰%산금파
酒精暴露%胰岛素抵抗%神经酰胺%胰岛素受体底物%免疫印迹法%小鼠
酒精暴露%胰島素牴抗%神經酰胺%胰島素受體底物%免疫印跡法%小鼠
주정폭로%이도소저항%신경선알%이도소수체저물%면역인적법%소서
Ethanol exposure%Insulin resistance%Ceramide%Insulin receptor substrate%Western blotting%Mouse
目的 探讨长期酒精暴露与胰岛素敏感性之间的关系并探讨其相关的分子机制;观察神经酰胺在酒精引起胰岛素抵抗过程中的可能作用.方法 建立C57BL/6J野生型(WT)小鼠和神经鞘磷脂合成酶2基因敲除(SMS2-/-)3月龄小鼠的长期酒精暴露模型,两基因型小鼠又分为对照组、中剂量酒精组和高剂量酒精组,共计90只.建模5个月后,用血糖仪测定小鼠空腹血糖值,用酶学法检测血清胰岛素浓度,并计算胰岛素抵抗指数.利用免疫荧光染色法观察各组小鼠海马CA1区胰岛素受体底物2(IRS2)阳性细胞表达情况,免疫印迹法检测小鼠海马组织IRS2蛋白的相对表达量.结果 1.长期酒精暴露导致WT和SMS2-/-小鼠空腹血糖值和胰岛素抵抗指数升高,且具有剂量依赖性(P＜0.05);但SMS2-/-小鼠随着酒精剂量的增加胰岛素抵抗指数升高幅度较小.2.免疫组织化学染色显示,酒精暴露诱导WT和SMS2-/-小鼠海马IRS2阳性细胞数降低,有剂量依赖性(P＜0.05);与相同处理条件的WT小鼠相比,酒精诱导SMS2--小鼠海马IRS2阳性细胞数降低增多(P＜0.05).3.免疫印迹法检测各组间小鼠海马组织IRS2蛋白相对表达量与上述结果一致.结论 长期酒精暴露可引起胰岛素抵抗,IRS2蛋白表达降低,且存在剂量依赖性,因此酒精导致IRS2表达下降可能是胰岛素抵抗的分子机制之一;神经酰胺可能参与酒精暴露诱导IRS2表达下降的过程,且有促进胰岛素抵抗形成的作用.
目的 探討長期酒精暴露與胰島素敏感性之間的關繫併探討其相關的分子機製;觀察神經酰胺在酒精引起胰島素牴抗過程中的可能作用.方法 建立C57BL/6J野生型(WT)小鼠和神經鞘燐脂閤成酶2基因敲除(SMS2-/-)3月齡小鼠的長期酒精暴露模型,兩基因型小鼠又分為對照組、中劑量酒精組和高劑量酒精組,共計90隻.建模5箇月後,用血糖儀測定小鼠空腹血糖值,用酶學法檢測血清胰島素濃度,併計算胰島素牴抗指數.利用免疫熒光染色法觀察各組小鼠海馬CA1區胰島素受體底物2(IRS2)暘性細胞錶達情況,免疫印跡法檢測小鼠海馬組織IRS2蛋白的相對錶達量.結果 1.長期酒精暴露導緻WT和SMS2-/-小鼠空腹血糖值和胰島素牴抗指數升高,且具有劑量依賴性(P＜0.05);但SMS2-/-小鼠隨著酒精劑量的增加胰島素牴抗指數升高幅度較小.2.免疫組織化學染色顯示,酒精暴露誘導WT和SMS2-/-小鼠海馬IRS2暘性細胞數降低,有劑量依賴性(P＜0.05);與相同處理條件的WT小鼠相比,酒精誘導SMS2--小鼠海馬IRS2暘性細胞數降低增多(P＜0.05).3.免疫印跡法檢測各組間小鼠海馬組織IRS2蛋白相對錶達量與上述結果一緻.結論 長期酒精暴露可引起胰島素牴抗,IRS2蛋白錶達降低,且存在劑量依賴性,因此酒精導緻IRS2錶達下降可能是胰島素牴抗的分子機製之一;神經酰胺可能參與酒精暴露誘導IRS2錶達下降的過程,且有促進胰島素牴抗形成的作用.
목적 탐토장기주정폭로여이도소민감성지간적관계병탐토기상관적분자궤제;관찰신경선알재주정인기이도소저항과정중적가능작용.방법 건립C57BL/6J야생형(WT)소서화신경초린지합성매2기인고제(SMS2-/-)3월령소서적장기주정폭로모형,량기인형소서우분위대조조、중제량주정조화고제량주정조,공계90지.건모5개월후,용혈당의측정소서공복혈당치,용매학법검측혈청이도소농도,병계산이도소저항지수.이용면역형광염색법관찰각조소서해마CA1구이도소수체저물2(IRS2)양성세포표체정황,면역인적법검측소서해마조직IRS2단백적상대표체량.결과 1.장기주정폭로도치WT화SMS2-/-소서공복혈당치화이도소저항지수승고,차구유제량의뢰성(P＜0.05);단SMS2-/-소서수착주정제량적증가이도소저항지수승고폭도교소.2.면역조직화학염색현시,주정폭로유도WT화SMS2-/-소서해마IRS2양성세포수강저,유제량의뢰성(P＜0.05);여상동처리조건적WT소서상비,주정유도SMS2--소서해마IRS2양성세포수강저증다(P＜0.05).3.면역인적법검측각조간소서해마조직IRS2단백상대표체량여상술결과일치.결론 장기주정폭로가인기이도소저항,IRS2단백표체강저,차존재제량의뢰성,인차주정도치IRS2표체하강가능시이도소저항적분자궤제지일;신경선알가능삼여주정폭로유도IRS2표체하강적과정,차유촉진이도소저항형성적작용.
