中国临床医学
中國臨床醫學
중국림상의학
CLINICAL MEDICAL JOURNAL OF CHINA
2013年
6期
772-775
,共4页
吴倩%袁凯%钱成%王勇%童继春%袁卫东
吳倩%袁凱%錢成%王勇%童繼春%袁衛東
오천%원개%전성%왕용%동계춘%원위동
肺腺癌%化疗耐药%缺氧诱导因子-2α%小干扰RNA%多药耐药基因1
肺腺癌%化療耐藥%缺氧誘導因子-2α%小榦擾RNA%多藥耐藥基因1
폐선암%화료내약%결양유도인자-2α%소간우RNA%다약내약기인1
Lung adenocarcinoma%Chemotherapy resistance%Hypoxia inducible factor-2 alpha%Small interfering RNA%Multidrug resistance-1
目的:探讨小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默缺氧诱导因子2α(hypoxia inducible factor-2 alpha,HIF2α)基因表达后,人肺腺癌A549细胞株对顺铂耐药性的变化.方法:构建靶向HIF-2α基因的siRNA真核表达载体并转染A549细胞,采用Reαl-time PCR检测HIF-2α mRNA的表达,采用Western blotting检测HIF-2α及多药耐药基因1(multidrug resistance-1,Mdr-1)蛋白的表达,采用MTT法检测顺铂处理后细胞的存活率.结果:在HIF-2α siRNA转染A549细胞后24、48 h后,HIF-2α在mRNA和蛋白水平的表达与空白对照组相比均显著下调(均P＜0.01),Mdr 1蛋白的表达水平也明显降低(均P＜0.05).与空白对照组相比,HIF-2α siRNA组细胞对顺铂的敏感性明显增加,各时间点的IC50值均显著降低,差异有统计学意义(均P＜0.01).结论:靶向HIF-2α的siRNA表达载体能够有效抑制HIF-2α基因的表达,从而逆转A549细胞对顺铂的化疗耐药性.
目的:探討小榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默缺氧誘導因子2α(hypoxia inducible factor-2 alpha,HIF2α)基因錶達後,人肺腺癌A549細胞株對順鉑耐藥性的變化.方法:構建靶嚮HIF-2α基因的siRNA真覈錶達載體併轉染A549細胞,採用Reαl-time PCR檢測HIF-2α mRNA的錶達,採用Western blotting檢測HIF-2α及多藥耐藥基因1(multidrug resistance-1,Mdr-1)蛋白的錶達,採用MTT法檢測順鉑處理後細胞的存活率.結果:在HIF-2α siRNA轉染A549細胞後24、48 h後,HIF-2α在mRNA和蛋白水平的錶達與空白對照組相比均顯著下調(均P＜0.01),Mdr 1蛋白的錶達水平也明顯降低(均P＜0.05).與空白對照組相比,HIF-2α siRNA組細胞對順鉑的敏感性明顯增加,各時間點的IC50值均顯著降低,差異有統計學意義(均P＜0.01).結論:靶嚮HIF-2α的siRNA錶達載體能夠有效抑製HIF-2α基因的錶達,從而逆轉A549細胞對順鉑的化療耐藥性.
목적:탐토소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)침묵결양유도인자2α(hypoxia inducible factor-2 alpha,HIF2α)기인표체후,인폐선암A549세포주대순박내약성적변화.방법:구건파향HIF-2α기인적siRNA진핵표체재체병전염A549세포,채용Reαl-time PCR검측HIF-2α mRNA적표체,채용Western blotting검측HIF-2α급다약내약기인1(multidrug resistance-1,Mdr-1)단백적표체,채용MTT법검측순박처리후세포적존활솔.결과:재HIF-2α siRNA전염A549세포후24、48 h후,HIF-2α재mRNA화단백수평적표체여공백대조조상비균현저하조(균P＜0.01),Mdr 1단백적표체수평야명현강저(균P＜0.05).여공백대조조상비,HIF-2α siRNA조세포대순박적민감성명현증가,각시간점적IC50치균현저강저,차이유통계학의의(균P＜0.01).결론:파향HIF-2α적siRNA표체재체능구유효억제HIF-2α기인적표체,종이역전A549세포대순박적화료내약성.
