CAJ | 학술논문

目的:观察去前肢卵巢对大鼠腰椎间盘和椎体骨密度的影响,建立大鼠肾虚型腰椎间盘退变模型,探讨椎间盘退变的内在机制、椎间盘退变和骨质疏松之间的关系.方法:选择1月龄雌性SD大鼠30只,随机分为正常对照组、腰椎间盘退变组、肾虚型腰椎间盘退变组(复合模型组),每组10只.腰椎间盘退变组大鼠去除双前肢,肾虚型腰椎间盘退变组大鼠在去除双前肢3个月后,再去除双卵巢.8个月后,通过Micro-CT扫描观察椎体骨密度,藏红O-快绿染色法观测椎间盘组织形态学改变,免疫组织化学法观察Ⅱ、X胶原在椎间盘中的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测细胞外基质相关基因的表达,以评价去除双前肢和双卵巢对椎间盘退变和椎体骨密度的影响.结果:Micro-CT扫描发现,肾虚型腰椎间盘退变组动物椎体骨质疏松明显;藏红O-快绿染色法显示椎间隙变窄,肾虚型腰椎间盘退变组椎间盘组织退变明显,软骨板发育不全;免疫组织化学染色显示肾虚型腰椎间盘退变组相对于正常对照组,椎间盘内X型胶原表达增加,Ⅱ型胶原表达降低;RT-PCR分析发现,腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col2a1)基因的表达较正常对照组低,3组比较差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000);腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组聚集蛋白聚糖(aggrecan-1,Agc1)基因的表达较正常对照组低,差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000);腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组X型胶原(typeX collagen,Col10al)基因的表达较正常对照组高,差异无统计学意义;肾虚型腰椎间盘退变组基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)基因的表达较正常对照组和腰椎间盘退变组高,3组比较差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000);腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组聚集蛋白聚糖降解酶2(aggrecanase-2,ADAMTS-5)基因的表达较正常对照组高,差异有统计学意义(P=-0.006,P=0.008).结论:采用去双前肢和去卵巢的方式建立的大鼠腰椎间盘退变模型,出现了肾虚“骨象”——骨质疏松,并在组织形态学、分子细胞生物学等方面的表现与临床肾虚型腰椎间盘退变更加相似. 目的:觀察去前肢卵巢對大鼠腰椎間盤和椎體骨密度的影響,建立大鼠腎虛型腰椎間盤退變模型,探討椎間盤退變的內在機製、椎間盤退變和骨質疏鬆之間的關繫.方法:選擇1月齡雌性SD大鼠30隻,隨機分為正常對照組、腰椎間盤退變組、腎虛型腰椎間盤退變組(複閤模型組),每組10隻.腰椎間盤退變組大鼠去除雙前肢,腎虛型腰椎間盤退變組大鼠在去除雙前肢3箇月後,再去除雙卵巢.8箇月後,通過Micro-CT掃描觀察椎體骨密度,藏紅O-快綠染色法觀測椎間盤組織形態學改變,免疫組織化學法觀察Ⅱ、X膠原在椎間盤中的蛋白錶達,實時熒光定量聚閤酶鏈式反應(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)法檢測細胞外基質相關基因的錶達,以評價去除雙前肢和雙卵巢對椎間盤退變和椎體骨密度的影響.結果:Micro-CT掃描髮現,腎虛型腰椎間盤退變組動物椎體骨質疏鬆明顯;藏紅O-快綠染色法顯示椎間隙變窄,腎虛型腰椎間盤退變組椎間盤組織退變明顯,軟骨闆髮育不全;免疫組織化學染色顯示腎虛型腰椎間盤退變組相對于正常對照組,椎間盤內X型膠原錶達增加,Ⅱ型膠原錶達降低;RT-PCR分析髮現,腰椎間盤退變組和腎虛型腰椎間盤退變組Ⅱ型膠原(typeⅡcollagen,Col2a1)基因的錶達較正常對照組低,3組比較差異有統計學意義(P=0.000,P=0.000);腰椎間盤退變組和腎虛型腰椎間盤退變組聚集蛋白聚糖(aggrecan-1,Agc1)基因的錶達較正常對照組低,差異有統計學意義(P=0.000,P=0.000);腰椎間盤退變組和腎虛型腰椎間盤退變組X型膠原(typeX collagen,Col10al)基因的錶達較正常對照組高,差異無統計學意義;腎虛型腰椎間盤退變組基質金屬蛋白酶-13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)基因的錶達較正常對照組和腰椎間盤退變組高,3組比較差異有統計學意義(P=0.000,P=0.000);腰椎間盤退變組和腎虛型腰椎間盤退變組聚集蛋白聚糖降解酶2(aggrecanase-2,ADAMTS-5)基因的錶達較正常對照組高,差異有統計學意義(P=-0.006,P=0.008).結論:採用去雙前肢和去卵巢的方式建立的大鼠腰椎間盤退變模型,齣現瞭腎虛“骨象”——骨質疏鬆,併在組織形態學、分子細胞生物學等方麵的錶現與臨床腎虛型腰椎間盤退變更加相似.
목적:관찰거전지란소대대서요추간반화추체골밀도적영향,건립대서신허형요추간반퇴변모형,탐토추간반퇴변적내재궤제、추간반퇴변화골질소송지간적관계.방법:선택1월령자성SD대서30지,수궤분위정상대조조、요추간반퇴변조、신허형요추간반퇴변조(복합모형조),매조10지.요추간반퇴변조대서거제쌍전지,신허형요추간반퇴변조대서재거제쌍전지3개월후,재거제쌍란소.8개월후,통과Micro-CT소묘관찰추체골밀도,장홍O-쾌록염색법관측추간반조직형태학개변,면역조직화학법관찰Ⅱ、X효원재추간반중적단백표체,실시형광정량취합매련식반응(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)법검측세포외기질상관기인적표체,이평개거제쌍전지화쌍란소대추간반퇴변화추체골밀도적영향.결과:Micro-CT소묘발현,신허형요추간반퇴변조동물추체골질소송명현;장홍O-쾌록염색법현시추간극변착,신허형요추간반퇴변조추간반조직퇴변명현,연골판발육불전;면역조직화학염색현시신허형요추간반퇴변조상대우정상대조조,추간반내X형효원표체증가,Ⅱ형효원표체강저;RT-PCR분석발현,요추간반퇴변조화신허형요추간반퇴변조Ⅱ형효원(typeⅡcollagen,Col2a1)기인적표체교정상대조조저,3조비교차이유통계학의의(P=0.000,P=0.000);요추간반퇴변조화신허형요추간반퇴변조취집단백취당(aggrecan-1,Agc1)기인적표체교정상대조조저,차이유통계학의의(P=0.000,P=0.000);요추간반퇴변조화신허형요추간반퇴변조X형효원(typeX collagen,Col10al)기인적표체교정상대조조고,차이무통계학의의;신허형요추간반퇴변조기질금속단백매-13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)기인적표체교정상대조조화요추간반퇴변조고,3조비교차이유통계학의의(P=0.000,P=0.000);요추간반퇴변조화신허형요추간반퇴변조취집단백취당강해매2(aggrecanase-2,ADAMTS-5)기인적표체교정상대조조고,차이유통계학의의(P=-0.006,P=0.008).결론:채용거쌍전지화거란소적방식건립적대서요추간반퇴변모형,출현료신허“골상”——골질소송,병재조직형태학、분자세포생물학등방면적표현여림상신허형요추간반퇴변경가상사.