南方农业学报
南方農業學報
남방농업학보
GUANGXI AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
12期
2040-2045
,共6页
戴雪梅%李哲%华玉伟%黄天带%孙爱花%周权男%黄华孙
戴雪梅%李哲%華玉偉%黃天帶%孫愛花%週權男%黃華孫
대설매%리철%화옥위%황천대%손애화%주권남%황화손
橡胶树%热研8-79%胚性悬浮细胞%原生质体%看护培养%植株再生
橡膠樹%熱研8-79%胚性懸浮細胞%原生質體%看護培養%植株再生
상효수%열연8-79%배성현부세포%원생질체%간호배양%식주재생
Hevea brasiliensis%Reyan 8-79%embryogenic cell suspension%protoplast%nurse culture%plant regeneration
[目的]优化橡胶树热研8-79原生质体分离和培养条件,建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系,为橡胶树体细胞杂交育种奠定基础.[方法]以橡胶树热研8-79花药愈伤组织建立的胚性细胞悬浮系为试验材料,设计不同酶组合、酶解时间和悬浮细胞继代时间进行原生质体分离,采用不同培养基、看护细胞浓度和接种密度进行原生质体培养,对原生质体分裂发育的小愈伤组织进行体细胞胚诱导及植株再生培养,统计原生质体的产量、分裂频率、体胚数及体胚萌发率.[结果]酶组合为纤维素酶1.50％+果胶酶0.15％+离析酶0.50％、酶解时间为12h时,继代培养第5d的胚性悬浮细胞达最高产量(3.6 ×107个/mL PCV);用酶解细胞和看护细胞继代培养基分别作为原生质体液体培养基和看护培养基,比使用KPR培养基更有利于原生质体的分裂,当看护细胞浓度为5％、接种密度为5×105个/mL时原生质体的分裂频率最高,达54％.原生质体持续分裂形成肉眼可见的小愈伤组织增殖后经体胚发生途径发育成完整的小植株.[结论]通过优化橡胶树热研8-79胚性悬浮细胞原生质体分离的酶组合、酶解时间、继代培养时间及看护培养过程中培养基组成、看护细胞浓度和接种密度等影响因素,可以建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系.
[目的]優化橡膠樹熱研8-79原生質體分離和培養條件,建立橡膠樹原生質體培養植株高效再生體繫,為橡膠樹體細胞雜交育種奠定基礎.[方法]以橡膠樹熱研8-79花藥愈傷組織建立的胚性細胞懸浮繫為試驗材料,設計不同酶組閤、酶解時間和懸浮細胞繼代時間進行原生質體分離,採用不同培養基、看護細胞濃度和接種密度進行原生質體培養,對原生質體分裂髮育的小愈傷組織進行體細胞胚誘導及植株再生培養,統計原生質體的產量、分裂頻率、體胚數及體胚萌髮率.[結果]酶組閤為纖維素酶1.50％+果膠酶0.15％+離析酶0.50％、酶解時間為12h時,繼代培養第5d的胚性懸浮細胞達最高產量(3.6 ×107箇/mL PCV);用酶解細胞和看護細胞繼代培養基分彆作為原生質體液體培養基和看護培養基,比使用KPR培養基更有利于原生質體的分裂,噹看護細胞濃度為5％、接種密度為5×105箇/mL時原生質體的分裂頻率最高,達54％.原生質體持續分裂形成肉眼可見的小愈傷組織增殖後經體胚髮生途徑髮育成完整的小植株.[結論]通過優化橡膠樹熱研8-79胚性懸浮細胞原生質體分離的酶組閤、酶解時間、繼代培養時間及看護培養過程中培養基組成、看護細胞濃度和接種密度等影響因素,可以建立橡膠樹原生質體培養植株高效再生體繫.
[목적]우화상효수열연8-79원생질체분리화배양조건,건립상효수원생질체배양식주고효재생체계,위상효수체세포잡교육충전정기출.[방법]이상효수열연8-79화약유상조직건립적배성세포현부계위시험재료,설계불동매조합、매해시간화현부세포계대시간진행원생질체분리,채용불동배양기、간호세포농도화접충밀도진행원생질체배양,대원생질체분렬발육적소유상조직진행체세포배유도급식주재생배양,통계원생질체적산량、분렬빈솔、체배수급체배맹발솔.[결과]매조합위섬유소매1.50％+과효매0.15％+리석매0.50％、매해시간위12h시,계대배양제5d적배성현부세포체최고산량(3.6 ×107개/mL PCV);용매해세포화간호세포계대배양기분별작위원생질체액체배양기화간호배양기,비사용KPR배양기경유리우원생질체적분렬,당간호세포농도위5％、접충밀도위5×105개/mL시원생질체적분렬빈솔최고,체54％.원생질체지속분렬형성육안가견적소유상조직증식후경체배발생도경발육성완정적소식주.[결론]통과우화상효수열연8-79배성현부세포원생질체분리적매조합、매해시간、계대배양시간급간호배양과정중배양기조성、간호세포농도화접충밀도등영향인소,가이건립상효수원생질체배양식주고효재생체계.
