南方农业学报
南方農業學報
남방농업학보
GUANGXI AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
12期
1963-1966
,共4页
烟草%胚胎发生%整体透明法%酶解分离法%观察方法
煙草%胚胎髮生%整體透明法%酶解分離法%觀察方法
연초%배태발생%정체투명법%매해분리법%관찰방법
tobacco%embryogenesis%whole tissue clearing%enzymatic isolation%observation method
[目的]分析整体透明法和酶解分离法在烟草早期胚胎观察中的应用效果,为烟草细胞发育研究提供参考.[方法]分别采用整体透明法和酶解分离法对烟草早期胚胎细胞进行连续观察,分析两种方法的优缺点.[结果]采用整体透明法观察烟草胚胎,均可清晰观察到烟草的2-细胞原胚、4-细胞原胚至未分化的球形胚,而观察的早期球形胚基部胚柄不够清晰,且后期发育的胚胎不易观察.酶解分离法能够观察到烟草整个发育阶段的胚胎,即烟草2-细胞原胚、开始分化的球形胚、心形胚;但经二次酶解分离,从2-细胞原胚到16-细胞早期球形胚时期的胚胎细胞均存在质壁分离现象,而晚期胚胎末出现此现象.整体透明法具有操作简便、所需材料较少、具有原位地形学观察等优点,能够保持胚胎组织的原位性.酶解分离法耗时较短,但其胚胎细胞缺乏原位性,部分存在质壁分离现象,可获得独立的不包含母体组织的胚胎细胞.[结论]在烟草胚胎发育时期,可根据对不同时期胚胎研究的需要,合理选择适宜的观察方法;或结合整体透明观察法与酶解分离法对早期胚胎进行观察,提高烟草胚胎发生的连续观察效果.
[目的]分析整體透明法和酶解分離法在煙草早期胚胎觀察中的應用效果,為煙草細胞髮育研究提供參攷.[方法]分彆採用整體透明法和酶解分離法對煙草早期胚胎細胞進行連續觀察,分析兩種方法的優缺點.[結果]採用整體透明法觀察煙草胚胎,均可清晰觀察到煙草的2-細胞原胚、4-細胞原胚至未分化的毬形胚,而觀察的早期毬形胚基部胚柄不夠清晰,且後期髮育的胚胎不易觀察.酶解分離法能夠觀察到煙草整箇髮育階段的胚胎,即煙草2-細胞原胚、開始分化的毬形胚、心形胚;但經二次酶解分離,從2-細胞原胚到16-細胞早期毬形胚時期的胚胎細胞均存在質壁分離現象,而晚期胚胎末齣現此現象.整體透明法具有操作簡便、所需材料較少、具有原位地形學觀察等優點,能夠保持胚胎組織的原位性.酶解分離法耗時較短,但其胚胎細胞缺乏原位性,部分存在質壁分離現象,可穫得獨立的不包含母體組織的胚胎細胞.[結論]在煙草胚胎髮育時期,可根據對不同時期胚胎研究的需要,閤理選擇適宜的觀察方法;或結閤整體透明觀察法與酶解分離法對早期胚胎進行觀察,提高煙草胚胎髮生的連續觀察效果.
[목적]분석정체투명법화매해분리법재연초조기배태관찰중적응용효과,위연초세포발육연구제공삼고.[방법]분별채용정체투명법화매해분리법대연초조기배태세포진행련속관찰,분석량충방법적우결점.[결과]채용정체투명법관찰연초배태,균가청석관찰도연초적2-세포원배、4-세포원배지미분화적구형배,이관찰적조기구형배기부배병불구청석,차후기발육적배태불역관찰.매해분리법능구관찰도연초정개발육계단적배태,즉연초2-세포원배、개시분화적구형배、심형배;단경이차매해분리,종2-세포원배도16-세포조기구형배시기적배태세포균존재질벽분리현상,이만기배태말출현차현상.정체투명법구유조작간편、소수재료교소、구유원위지형학관찰등우점,능구보지배태조직적원위성.매해분리법모시교단,단기배태세포결핍원위성,부분존재질벽분리현상,가획득독립적불포함모체조직적배태세포.[결론]재연초배태발육시기,가근거대불동시기배태연구적수요,합리선택괄의적관찰방법;혹결합정체투명관찰법여매해분리법대조기배태진행관찰,제고연초배태발생적련속관찰효과.