分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2013年
12期
1789-1794
,共6页
周冰%卢明倩%赵丽伟%黄庶识%陈丽梅
週冰%盧明倩%趙麗偉%黃庶識%陳麗梅
주빙%로명천%조려위%황서식%진려매
大肠杆菌%14-3-3b%可溶性蛋白%包涵体蛋白%激光镊子拉曼光谱
大腸桿菌%14-3-3b%可溶性蛋白%包涵體蛋白%激光鑷子拉曼光譜
대장간균%14-3-3b%가용성단백%포함체단백%격광섭자랍만광보
Escherichia coli%14-3-3b isoform%Soluble protein%Inclusion body protein%Laser tweezers Raman spectroscopy
采用激光镊子拉曼光谱(LTRS)分析大肠杆菌(Escherichia.coli)表达蚕豆(Vicia faba L.)14-3-3b可溶性蛋白(Soluble protein)与包涵体蛋白(Inclusionbody protein)的结构差异以及两种蛋白在不同温度下在重组菌中的表达水平.结果表明,14-3-3b可溶性蛋白与包涵体蛋白有明显不同的拉曼光谱特征峰,说明LTRS 技术可以鉴定14-3-3b的可溶性蛋白和包涵体蛋白.14-3-3b可溶性蛋白特征峰1002,1451和1665 cm-1在16℃下诱导的重组菌中明显增强,在28℃下诱导的重组菌中明显减弱,而反映14-3-3b包涵体蛋白的特征峰900和1446 cm-1在16℃下诱导的重组菌中明显减弱,在28℃下诱导的重组菌中明显增强,这几个峰强的变化反映14-3-3b可溶性蛋白与包涵体蛋白在大肠杆菌细胞中表达水平的变化和SDS-PAGE电泳分析的结果一致.说明LTRS是检测单个大肠杆菌细胞中可溶性重组蛋白和包涵体蛋白表达水平的一种快速有效的方法.
採用激光鑷子拉曼光譜(LTRS)分析大腸桿菌(Escherichia.coli)錶達蠶豆(Vicia faba L.)14-3-3b可溶性蛋白(Soluble protein)與包涵體蛋白(Inclusionbody protein)的結構差異以及兩種蛋白在不同溫度下在重組菌中的錶達水平.結果錶明,14-3-3b可溶性蛋白與包涵體蛋白有明顯不同的拉曼光譜特徵峰,說明LTRS 技術可以鑒定14-3-3b的可溶性蛋白和包涵體蛋白.14-3-3b可溶性蛋白特徵峰1002,1451和1665 cm-1在16℃下誘導的重組菌中明顯增彊,在28℃下誘導的重組菌中明顯減弱,而反映14-3-3b包涵體蛋白的特徵峰900和1446 cm-1在16℃下誘導的重組菌中明顯減弱,在28℃下誘導的重組菌中明顯增彊,這幾箇峰彊的變化反映14-3-3b可溶性蛋白與包涵體蛋白在大腸桿菌細胞中錶達水平的變化和SDS-PAGE電泳分析的結果一緻.說明LTRS是檢測單箇大腸桿菌細胞中可溶性重組蛋白和包涵體蛋白錶達水平的一種快速有效的方法.
채용격광섭자랍만광보(LTRS)분석대장간균(Escherichia.coli)표체잠두(Vicia faba L.)14-3-3b가용성단백(Soluble protein)여포함체단백(Inclusionbody protein)적결구차이이급량충단백재불동온도하재중조균중적표체수평.결과표명,14-3-3b가용성단백여포함체단백유명현불동적랍만광보특정봉,설명LTRS 기술가이감정14-3-3b적가용성단백화포함체단백.14-3-3b가용성단백특정봉1002,1451화1665 cm-1재16℃하유도적중조균중명현증강,재28℃하유도적중조균중명현감약,이반영14-3-3b포함체단백적특정봉900화1446 cm-1재16℃하유도적중조균중명현감약,재28℃하유도적중조균중명현증강,저궤개봉강적변화반영14-3-3b가용성단백여포함체단백재대장간균세포중표체수평적변화화SDS-PAGE전영분석적결과일치.설명LTRS시검측단개대장간균세포중가용성중조단백화포함체단백표체수평적일충쾌속유효적방법.