山西农业科学
山西農業科學
산서농업과학
JOURNAL OF SHANXI AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
1期
1-5
,共5页
漆酶%克隆%异源表达%辣椒疫霉
漆酶%剋隆%異源錶達%辣椒疫黴
칠매%극륭%이원표체%랄초역매
laccase%cloning%,expression%Phytophthora capsici
辣椒疫霉是一种侵染性植物病原,能引起多种茄科及葫芦科植物的病害.利用同源克隆法从辣椒疫霉基因组内克隆了漆酶基因Pc lac3,该基因全长1 881个核苷酸,编码626个氨基酸,与已知的真菌漆酶基因具有较高的同源性,并且具备漆酶基因的保守区域.利用PCR将该基因克隆于pPIC9K载体,并转化于毕赤酵母GS115,经过1％甲醇诱导表达获得其异源表达产物.将表达产物进行SDS-PAGE检测,获得分子量大约为90 kDa的特异蛋白.利用ABTS法对Pc lac3的表达产物粗酶液进行酶活性分析发现,其活性在第11天时最大,达到45 U/mL.这为研究辣椒疫霉漆酶基因家族及探索卵菌漆酶生物活性及其潜在的应用提供了理论依据.
辣椒疫黴是一種侵染性植物病原,能引起多種茄科及葫蘆科植物的病害.利用同源剋隆法從辣椒疫黴基因組內剋隆瞭漆酶基因Pc lac3,該基因全長1 881箇覈苷痠,編碼626箇氨基痠,與已知的真菌漆酶基因具有較高的同源性,併且具備漆酶基因的保守區域.利用PCR將該基因剋隆于pPIC9K載體,併轉化于畢赤酵母GS115,經過1％甲醇誘導錶達穫得其異源錶達產物.將錶達產物進行SDS-PAGE檢測,穫得分子量大約為90 kDa的特異蛋白.利用ABTS法對Pc lac3的錶達產物粗酶液進行酶活性分析髮現,其活性在第11天時最大,達到45 U/mL.這為研究辣椒疫黴漆酶基因傢族及探索卵菌漆酶生物活性及其潛在的應用提供瞭理論依據.
랄초역매시일충침염성식물병원,능인기다충가과급호호과식물적병해.이용동원극륭법종랄초역매기인조내극륭료칠매기인Pc lac3,해기인전장1 881개핵감산,편마626개안기산,여이지적진균칠매기인구유교고적동원성,병차구비칠매기인적보수구역.이용PCR장해기인극륭우pPIC9K재체,병전화우필적효모GS115,경과1％갑순유도표체획득기이원표체산물.장표체산물진행SDS-PAGE검측,획득분자량대약위90 kDa적특이단백.이용ABTS법대Pc lac3적표체산물조매액진행매활성분석발현,기활성재제11천시최대,체도45 U/mL.저위연구랄초역매칠매기인가족급탐색란균칠매생물활성급기잠재적응용제공료이론의거.
