军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2013年
12期
943-946
,共4页
崔茜%刘威%杨展%陆思静%袁静%李艳
崔茜%劉威%楊展%陸思靜%袁靜%李豔
최천%류위%양전%륙사정%원정%리염
L2型头孢菌素β-内酰胺酶基因%环介导恒温扩增技术(LAMP)%快速检测%嗜麦芽寡养单胞菌
L2型頭孢菌素β-內酰胺酶基因%環介導恆溫擴增技術(LAMP)%快速檢測%嗜麥芽寡養單胞菌
L2형두포균소β-내선알매기인%배개도항온확증기술(LAMP)%쾌속검측%기맥아과양단포균
L2 type cephalosporinase beta lactamase gene%loop-mediated isothermal amplification%rapid diagnosis%Stenotrophomonas maltophilia
目的 建立快速检测L2型头孢菌素β内酰胺酶的方法.方法 利用DNA环介导恒温核酸扩增法(loopmediated isothermal amplification of DNA,LAMP)针对L2型头孢菌素β内酰胺酶基因设计的5条特异性引物,通过引物特异性识别特定BlaL:基因上的7个独立区域实现耐碳青霉烯类嗜麦芽寡养单胞菌的检测.实时浊度仪监测反应结果表明,LAMP反应在65℃恒温条件下50 min内完成;钙黄绿素可视化检测表明阳性结果呈绿色,与阴性结果差异显著.结果 LAMP法最低检出基因的浓度为2.58 pg/μl,其灵敏度为PCR法的100倍,且具有良好的特异性.结论 LAMP法具有过程简单、实验装置简便、结果肉眼可辨别、灵敏度高、特异性强等特点,对非L2型头孢菌素β内酰胺酶基因的结果呈阴性,适用于临床L2型头孢菌素β内酰胺酶基因的快速检测.
目的 建立快速檢測L2型頭孢菌素β內酰胺酶的方法.方法 利用DNA環介導恆溫覈痠擴增法(loopmediated isothermal amplification of DNA,LAMP)針對L2型頭孢菌素β內酰胺酶基因設計的5條特異性引物,通過引物特異性識彆特定BlaL:基因上的7箇獨立區域實現耐碳青黴烯類嗜麥芽寡養單胞菌的檢測.實時濁度儀鑑測反應結果錶明,LAMP反應在65℃恆溫條件下50 min內完成;鈣黃綠素可視化檢測錶明暘性結果呈綠色,與陰性結果差異顯著.結果 LAMP法最低檢齣基因的濃度為2.58 pg/μl,其靈敏度為PCR法的100倍,且具有良好的特異性.結論 LAMP法具有過程簡單、實驗裝置簡便、結果肉眼可辨彆、靈敏度高、特異性彊等特點,對非L2型頭孢菌素β內酰胺酶基因的結果呈陰性,適用于臨床L2型頭孢菌素β內酰胺酶基因的快速檢測.
목적 건립쾌속검측L2형두포균소β내선알매적방법.방법 이용DNA배개도항온핵산확증법(loopmediated isothermal amplification of DNA,LAMP)침대L2형두포균소β내선알매기인설계적5조특이성인물,통과인물특이성식별특정BlaL:기인상적7개독립구역실현내탄청매희류기맥아과양단포균적검측.실시탁도의감측반응결과표명,LAMP반응재65℃항온조건하50 min내완성;개황록소가시화검측표명양성결과정록색,여음성결과차이현저.결과 LAMP법최저검출기인적농도위2.58 pg/μl,기령민도위PCR법적100배,차구유량호적특이성.결론 LAMP법구유과정간단、실험장치간편、결과육안가변별、령민도고、특이성강등특점,대비L2형두포균소β내선알매기인적결과정음성,괄용우림상L2형두포균소β내선알매기인적쾌속검측.
