河北科技大学学报
河北科技大學學報
하북과기대학학보
JOURNAL OF THE HEBEI UNIVERSITY OF SCIENCE AND ECHNOLOGY
2014年
1期
51-57
,共7页
拟南芥%AGO1基因超表达%ago1突变体%叶片发育
擬南芥%AGO1基因超錶達%ago1突變體%葉片髮育
의남개%AGO1기인초표체%ago1돌변체%협편발육
Arabidopsis thanalia%AGO1 overexpression%ago1%Leaf development
在拟南芥和水稻中Argonaute (AGO)蛋白是RNA介导的沉默复合体(RISC)的核心组分,在植物叶极性的分化方面具有重要的调节作用.实验根据AGO1基因序列设计一对特异引物,提取野生型拟南芥RNA作为模板,采用反转录PCR方法扩增出AGO1基因,并插入到克隆载体pGEM-T中.筛选鉴定后将AGO1连接到植物表达载体pBI121上,构建起植物表达载体pBI121-A GO1.并且利用农杆菌介导的方法转化拟南芥,通过抗性筛选,获得转基因植株.然后对转基因植株进行表型分析及AGO1蛋白的RT-PCR检测.通过对转基因拟南芥表达分析发现,与野生型拟南芥相比超表达AGO1蛋白的转基因拟南芥叶片明显呈锯齿状,说明AGO1基因影响拟南芥叶片发育.
在擬南芥和水稻中Argonaute (AGO)蛋白是RNA介導的沉默複閤體(RISC)的覈心組分,在植物葉極性的分化方麵具有重要的調節作用.實驗根據AGO1基因序列設計一對特異引物,提取野生型擬南芥RNA作為模闆,採用反轉錄PCR方法擴增齣AGO1基因,併插入到剋隆載體pGEM-T中.篩選鑒定後將AGO1連接到植物錶達載體pBI121上,構建起植物錶達載體pBI121-A GO1.併且利用農桿菌介導的方法轉化擬南芥,通過抗性篩選,穫得轉基因植株.然後對轉基因植株進行錶型分析及AGO1蛋白的RT-PCR檢測.通過對轉基因擬南芥錶達分析髮現,與野生型擬南芥相比超錶達AGO1蛋白的轉基因擬南芥葉片明顯呈鋸齒狀,說明AGO1基因影響擬南芥葉片髮育.
재의남개화수도중Argonaute (AGO)단백시RNA개도적침묵복합체(RISC)적핵심조분,재식물협겁성적분화방면구유중요적조절작용.실험근거AGO1기인서렬설계일대특이인물,제취야생형의남개RNA작위모판,채용반전록PCR방법확증출AGO1기인,병삽입도극륭재체pGEM-T중.사선감정후장AGO1련접도식물표체재체pBI121상,구건기식물표체재체pBI121-A GO1.병차이용농간균개도적방법전화의남개,통과항성사선,획득전기인식주.연후대전기인식주진행표형분석급AGO1단백적RT-PCR검측.통과대전기인의남개표체분석발현,여야생형의남개상비초표체AGO1단백적전기인의남개협편명현정거치상,설명AGO1기인영향의남개협편발육.
