动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2014年
1期
17-21
,共5页
季新成%段琛%王克栋%史茜%于学辉%冉多良
季新成%段琛%王剋棟%史茜%于學輝%冉多良
계신성%단침%왕극동%사천%우학휘%염다량
牛病毒性腹泻病毒%内标%双重反转录-聚合酶链反应%共扩增
牛病毒性腹瀉病毒%內標%雙重反轉錄-聚閤酶鏈反應%共擴增
우병독성복사병독%내표%쌍중반전록-취합매련반응%공확증
为了对BVDV-1和BVDV-2进行同步检测,针对不同基因型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因组高度保守的5'-UTR核苷酸序列设计特异性引物(扩增长度为288 bp).为了指示假阴性结果,以牛GAPDH基因为内标基因,设计特异性引物(扩增序列长度为152 bp).通过反应条件的优化,建立了BVDV通用型内标双重RT-PCR检测方法,该方法可以监测RNA提取与RT-PCR反应过程,指示假阴性结果的发生.该方法的检测灵敏度约为100 TCID50/mL,且具有较好的特异性和可重复性.通过对566份临床样品检验,检测到阳性样品19份,阳性率3.36％.该方法可用于临床样品中BVDV检测,并可对检测结果进行质量控制.
為瞭對BVDV-1和BVDV-2進行同步檢測,針對不同基因型牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)基因組高度保守的5'-UTR覈苷痠序列設計特異性引物(擴增長度為288 bp).為瞭指示假陰性結果,以牛GAPDH基因為內標基因,設計特異性引物(擴增序列長度為152 bp).通過反應條件的優化,建立瞭BVDV通用型內標雙重RT-PCR檢測方法,該方法可以鑑測RNA提取與RT-PCR反應過程,指示假陰性結果的髮生.該方法的檢測靈敏度約為100 TCID50/mL,且具有較好的特異性和可重複性.通過對566份臨床樣品檢驗,檢測到暘性樣品19份,暘性率3.36％.該方法可用于臨床樣品中BVDV檢測,併可對檢測結果進行質量控製.
위료대BVDV-1화BVDV-2진행동보검측,침대불동기인형우병독성복사병독(BVDV)기인조고도보수적5'-UTR핵감산서렬설계특이성인물(확증장도위288 bp).위료지시가음성결과,이우GAPDH기인위내표기인,설계특이성인물(확증서렬장도위152 bp).통과반응조건적우화,건립료BVDV통용형내표쌍중RT-PCR검측방법,해방법가이감측RNA제취여RT-PCR반응과정,지시가음성결과적발생.해방법적검측령민도약위100 TCID50/mL,차구유교호적특이성화가중복성.통과대566빈림상양품검험,검측도양성양품19빈,양성솔3.36％.해방법가용우림상양품중BVDV검측,병가대검측결과진행질량공제.
