宁夏医科大学学报
寧夏醫科大學學報
저하의과대학학보
JOURNAL OF NINGXIA MEDICAL COLLEGE
2014年
1期
21-24,封4
,共5页
丁冬%曹军%王丽梅%郝铁成%焦旭文%牛建国%李军平%何仲义
丁鼕%曹軍%王麗梅%郝鐵成%焦旭文%牛建國%李軍平%何仲義
정동%조군%왕려매%학철성%초욱문%우건국%리군평%하중의
嗅鞘细胞%细胞纯度%细胞增殖%脑源性神经营养因子
嗅鞘細胞%細胞純度%細胞增殖%腦源性神經營養因子
후초세포%세포순도%세포증식%뇌원성신경영양인자
目的 采用改良差速贴壁联合胰酶限时消化法纯化大鼠嗅鞘细胞,并检测嗅鞘细胞的生物活性.方法 分离新生7d的SD大鼠嗅球嗅鞘细胞,分组后采用改良的6h和18h两次差速贴壁法联合不同时段(1、3和5min)胰酶消化法纯化培养,观察不同时段纯化的嗅鞘细胞的形态特点及生长情况; 应用FITC标记的神经生长因子受体p75抗体(兔抗鼠NGFRp75抗体)检测嗅鞘细胞并评估细胞纯度;应用CCK-8法和酶联免疫吸附法分别检测嗅鞘细胞在纯化后3~15d的增殖活性和分泌脑源性神经营养因子的含量.结果 随着细胞的生长,梭形的嗅鞘细胞逐渐增多;改良差速贴壁联合胰酶限时消化1min、3min、5min 法所得嗅鞘细胞纯度分别为(57.52±2.13)%、(78.95±2.60)%、(49.01±0.74)%,3min组最明显,组间两两比较差异有统计学意义(P＜0.05);改良差速贴壁法联合胰酶限时消化1min、3min、5min法所得嗅鞘细胞在纯化后7、9、11d时增殖的细胞数目和脑源性神经营养因子分泌量显示3min组最优,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 改良差速贴壁(6h+18h)联合胰酶限时消化3min的纯化方法能获得较高纯度的嗅鞘细胞.
目的 採用改良差速貼壁聯閤胰酶限時消化法純化大鼠嗅鞘細胞,併檢測嗅鞘細胞的生物活性.方法 分離新生7d的SD大鼠嗅毬嗅鞘細胞,分組後採用改良的6h和18h兩次差速貼壁法聯閤不同時段(1、3和5min)胰酶消化法純化培養,觀察不同時段純化的嗅鞘細胞的形態特點及生長情況; 應用FITC標記的神經生長因子受體p75抗體(兔抗鼠NGFRp75抗體)檢測嗅鞘細胞併評估細胞純度;應用CCK-8法和酶聯免疫吸附法分彆檢測嗅鞘細胞在純化後3~15d的增殖活性和分泌腦源性神經營養因子的含量.結果 隨著細胞的生長,梭形的嗅鞘細胞逐漸增多;改良差速貼壁聯閤胰酶限時消化1min、3min、5min 法所得嗅鞘細胞純度分彆為(57.52±2.13)%、(78.95±2.60)%、(49.01±0.74)%,3min組最明顯,組間兩兩比較差異有統計學意義(P＜0.05);改良差速貼壁法聯閤胰酶限時消化1min、3min、5min法所得嗅鞘細胞在純化後7、9、11d時增殖的細胞數目和腦源性神經營養因子分泌量顯示3min組最優,組間比較差異有統計學意義(P＜0.05).結論 改良差速貼壁(6h+18h)聯閤胰酶限時消化3min的純化方法能穫得較高純度的嗅鞘細胞.
목적 채용개량차속첩벽연합이매한시소화법순화대서후초세포,병검측후초세포적생물활성.방법 분리신생7d적SD대서후구후초세포,분조후채용개량적6h화18h량차차속첩벽법연합불동시단(1、3화5min)이매소화법순화배양,관찰불동시단순화적후초세포적형태특점급생장정황; 응용FITC표기적신경생장인자수체p75항체(토항서NGFRp75항체)검측후초세포병평고세포순도;응용CCK-8법화매련면역흡부법분별검측후초세포재순화후3~15d적증식활성화분비뇌원성신경영양인자적함량.결과 수착세포적생장,사형적후초세포축점증다;개량차속첩벽연합이매한시소화1min、3min、5min 법소득후초세포순도분별위(57.52±2.13)%、(78.95±2.60)%、(49.01±0.74)%,3min조최명현,조간량량비교차이유통계학의의(P＜0.05);개량차속첩벽법연합이매한시소화1min、3min、5min법소득후초세포재순화후7、9、11d시증식적세포수목화뇌원성신경영양인자분비량현시3min조최우,조간비교차이유통계학의의(P＜0.05).결론 개량차속첩벽(6h+18h)연합이매한시소화3min적순화방법능획득교고순도적후초세포.
