中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2014年
2期
166-169
,共4页
朱锦灿%陈小宇%祝爱珍%刘成成%刘善淘%刘革修
硃錦燦%陳小宇%祝愛珍%劉成成%劉善淘%劉革脩
주금찬%진소우%축애진%류성성%류선도%류혁수
FABP4%启动子%荧光素酶%质粒%转染
FABP4%啟動子%熒光素酶%質粒%轉染
FABP4%계동자%형광소매%질립%전염
FABP4%promoter%luciferase%plasmid%transfection
目的 构建含有人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)基因启动子荧光素酶报告基因质粒pGL3-Ba.ic-FABP4-promoter,为脂类代谢相关药物研究提供基础.方法 根据已知人的FABP4基因启动子序列设计引物,以人DNA为模板,用PCR法扩增出人FABP4基因启动子的DNA大片段.经过限制性内切酶KpnI和XhoI双酶切后插入到pGL3-Basic载体中;测序鉴定;然后将这些重组质粒瞬时转染到K293细胞中,并在24h后检测其荧光素酶活性.结果 构建的含荧光素酶基因的质粒,经酶切及测序鉴定结果显示FABP4启动子插入的位置和序列正确.转染细胞后检测其荧光显示:重组pGL3质粒转录活性较pGL3-Basic质粒明显增强(P＜ 0.001).结论 成功构建了pGL3-Basic-FABP4-promoter质粒,为进一步研究FABP4基因的表达调控提供了工具和基础.
目的 構建含有人脂肪細胞型脂肪痠結閤蛋白(FABP4)基因啟動子熒光素酶報告基因質粒pGL3-Ba.ic-FABP4-promoter,為脂類代謝相關藥物研究提供基礎.方法 根據已知人的FABP4基因啟動子序列設計引物,以人DNA為模闆,用PCR法擴增齣人FABP4基因啟動子的DNA大片段.經過限製性內切酶KpnI和XhoI雙酶切後插入到pGL3-Basic載體中;測序鑒定;然後將這些重組質粒瞬時轉染到K293細胞中,併在24h後檢測其熒光素酶活性.結果 構建的含熒光素酶基因的質粒,經酶切及測序鑒定結果顯示FABP4啟動子插入的位置和序列正確.轉染細胞後檢測其熒光顯示:重組pGL3質粒轉錄活性較pGL3-Basic質粒明顯增彊(P＜ 0.001).結論 成功構建瞭pGL3-Basic-FABP4-promoter質粒,為進一步研究FABP4基因的錶達調控提供瞭工具和基礎.
목적 구건함유인지방세포형지방산결합단백(FABP4)기인계동자형광소매보고기인질립pGL3-Ba.ic-FABP4-promoter,위지류대사상관약물연구제공기출.방법 근거이지인적FABP4기인계동자서렬설계인물,이인DNA위모판,용PCR법확증출인FABP4기인계동자적DNA대편단.경과한제성내절매KpnI화XhoI쌍매절후삽입도pGL3-Basic재체중;측서감정;연후장저사중조질립순시전염도K293세포중,병재24h후검측기형광소매활성.결과 구건적함형광소매기인적질립,경매절급측서감정결과현시FABP4계동자삽입적위치화서렬정학.전염세포후검측기형광현시:중조pGL3질립전록활성교pGL3-Basic질립명현증강(P＜ 0.001).결론 성공구건료pGL3-Basic-FABP4-promoter질립,위진일보연구FABP4기인적표체조공제공료공구화기출.
