中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
2期
134-139
,共6页
翟瑞东%王磊%计群%杨舒心%秦万海%韩文瑜%雷连成
翟瑞東%王磊%計群%楊舒心%秦萬海%韓文瑜%雷連成
적서동%왕뢰%계군%양서심%진만해%한문유%뢰련성
胸膜肺炎放线杆菌%三聚体自转运粘附素%△Apa1/△Apa2菌株%构建与生物学特性
胸膜肺炎放線桿菌%三聚體自轉運粘附素%△Apa1/△Apa2菌株%構建與生物學特性
흉막폐염방선간균%삼취체자전운점부소%△Apa1/△Apa2균주%구건여생물학특성
Actinobacillus pleuropneumoniae%trimeric autotransporter adhesins%△Apa1/△Apa2 mutant%construction and characterization
为研究三聚体自转运粘附素(TAAs)对胸膜肺炎放线杆菌(APP)生物学特性的影响,本研究利用自杀性载体系统,通过正负向筛选标记的同源重组方法筛选APP血清5b型L20菌株的TAAs基因Apa1及Apa2的双基因敲除菌株,命名为△Apa1/△Apa2菌株,以野生菌株为对照,比较△Apa1/△Apa2菌株在体外的生物学特性变化,以小鼠为动物模型检测TAAs基因缺失对细菌毒力的影响.体外试验表明,△Apa1/△Apa2菌株在BHI液体培养基中生长速率与野生菌株无明显差异;电镜下观察△Apa1/△Apa2菌株菌体表面粗糙,有絮状物沉积;自凝、被膜形成能力下降;对RAW264.7细胞的粘附效率低于野生菌株.小鼠体内试验表明TAAs基因的缺失导致细菌毒力降低,在肺部和脾脏的定殖菌量明显低于野生菌株,然而两者的病理学差异不显著.本研究表明TAAs影响APP的形态、自凝、被膜形成等特性,并在APP粘附细胞以及对小鼠致病性方面发挥重要作用,为进一步研究TAAs在APP感染机制中的作用奠定了基础.
為研究三聚體自轉運粘附素(TAAs)對胸膜肺炎放線桿菌(APP)生物學特性的影響,本研究利用自殺性載體繫統,通過正負嚮篩選標記的同源重組方法篩選APP血清5b型L20菌株的TAAs基因Apa1及Apa2的雙基因敲除菌株,命名為△Apa1/△Apa2菌株,以野生菌株為對照,比較△Apa1/△Apa2菌株在體外的生物學特性變化,以小鼠為動物模型檢測TAAs基因缺失對細菌毒力的影響.體外試驗錶明,△Apa1/△Apa2菌株在BHI液體培養基中生長速率與野生菌株無明顯差異;電鏡下觀察△Apa1/△Apa2菌株菌體錶麵粗糙,有絮狀物沉積;自凝、被膜形成能力下降;對RAW264.7細胞的粘附效率低于野生菌株.小鼠體內試驗錶明TAAs基因的缺失導緻細菌毒力降低,在肺部和脾髒的定殖菌量明顯低于野生菌株,然而兩者的病理學差異不顯著.本研究錶明TAAs影響APP的形態、自凝、被膜形成等特性,併在APP粘附細胞以及對小鼠緻病性方麵髮揮重要作用,為進一步研究TAAs在APP感染機製中的作用奠定瞭基礎.
위연구삼취체자전운점부소(TAAs)대흉막폐염방선간균(APP)생물학특성적영향,본연구이용자살성재체계통,통과정부향사선표기적동원중조방법사선APP혈청5b형L20균주적TAAs기인Apa1급Apa2적쌍기인고제균주,명명위△Apa1/△Apa2균주,이야생균주위대조,비교△Apa1/△Apa2균주재체외적생물학특성변화,이소서위동물모형검측TAAs기인결실대세균독력적영향.체외시험표명,△Apa1/△Apa2균주재BHI액체배양기중생장속솔여야생균주무명현차이;전경하관찰△Apa1/△Apa2균주균체표면조조,유서상물침적;자응、피막형성능력하강;대RAW264.7세포적점부효솔저우야생균주.소서체내시험표명TAAs기인적결실도치세균독력강저,재폐부화비장적정식균량명현저우야생균주,연이량자적병이학차이불현저.본연구표명TAAs영향APP적형태、자응、피막형성등특성,병재APP점부세포이급대소서치병성방면발휘중요작용,위진일보연구TAAs재APP감염궤제중적작용전정료기출.
