浙江农林大学学报
浙江農林大學學報
절강농림대학학보
JOURNAL OF ZHEJIANG FORESTRY COLLEGE
2014年
1期
14-18
,共5页
植物学%SEP3蛋白%原核表达%蛋白纯化%多聚体
植物學%SEP3蛋白%原覈錶達%蛋白純化%多聚體
식물학%SEP3단백%원핵표체%단백순화%다취체
botany%SEP3 protein%prokaryotic system%protein purification%polymer
SEPALLATA3(SEP3)属于花器官建成ABCE模型中的E类基因,为了揭示SEP3蛋白是如何形成多聚体的,以及多聚体与其生物学功能之间的联系,开展了拟南芥A rab idopsis thaliana AtSEP3蛋白质体外可溶性表达实验,构建了原核表达载体,并在大肠埃希菌Escherichia coli细胞中进行重组蛋白的诱导表达.从蛋白不同的结构域、诱导时间和诱导温度等方面对蛋白的可溶性表达进行了分析.最后以pET-15b为表达载体,大肠埃希菌表达菌株Ecoli‘Rosetta’为宿主菌株,22℃诱导表达15 h,获得不同片段的AtSEP3可溶性蛋白.通过镍柱及分子层析色谱柱分离纯化,表明AtSEP3蛋白以四聚体形式存在.
SEPALLATA3(SEP3)屬于花器官建成ABCE模型中的E類基因,為瞭揭示SEP3蛋白是如何形成多聚體的,以及多聚體與其生物學功能之間的聯繫,開展瞭擬南芥A rab idopsis thaliana AtSEP3蛋白質體外可溶性錶達實驗,構建瞭原覈錶達載體,併在大腸埃希菌Escherichia coli細胞中進行重組蛋白的誘導錶達.從蛋白不同的結構域、誘導時間和誘導溫度等方麵對蛋白的可溶性錶達進行瞭分析.最後以pET-15b為錶達載體,大腸埃希菌錶達菌株Ecoli‘Rosetta’為宿主菌株,22℃誘導錶達15 h,穫得不同片段的AtSEP3可溶性蛋白.通過鎳柱及分子層析色譜柱分離純化,錶明AtSEP3蛋白以四聚體形式存在.
SEPALLATA3(SEP3)속우화기관건성ABCE모형중적E류기인,위료게시SEP3단백시여하형성다취체적,이급다취체여기생물학공능지간적련계,개전료의남개A rab idopsis thaliana AtSEP3단백질체외가용성표체실험,구건료원핵표체재체,병재대장애희균Escherichia coli세포중진행중조단백적유도표체.종단백불동적결구역、유도시간화유도온도등방면대단백적가용성표체진행료분석.최후이pET-15b위표체재체,대장애희균표체균주Ecoli‘Rosetta’위숙주균주,22℃유도표체15 h,획득불동편단적AtSEP3가용성단백.통과얼주급분자층석색보주분리순화,표명AtSEP3단백이사취체형식존재.
