山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
37期
12-14,17
,共4页
腺相关病毒2%RNA干扰%正嗜肝DNA病毒属%基因疗法
腺相關病毒2%RNA榦擾%正嗜肝DNA病毒屬%基因療法
선상관병독2%RNA간우%정기간DNA병독속%기인요법
adeno-associated virus 2%RNA interference%orthohepad navirus%genetic therapy
目的 构建能抑制HBVm RNA表达的siRNA-重组腺相关病毒(rAAV)表达载体,观察重组病毒对HBV的抑制作用.方法 将设计好的siRNA克隆到骨架质粒pAAV-MC中,将该质粒与pAAV-RC和pHelper质粒共同转染人胚肾293T细胞,进行病毒包装.收获并纯化病毒,感染模型细胞HepG2.215,采用ELISA法和荧光定量PCR法检测包装的rAAV-shRNA-GFP病毒抑制HBV情况.结果 经酶切及测序证实,rAAV载体质粒pAAV-shR-NA-GFP构建成功,包装的rAAV-shRNA-GFP病毒感染HepG2.215细胞后,可以抑制HBsAg、HBeAg的表达和HBV的复制.结论 成功制备出rAAV-shRNA-GFP病毒,其能够抑制HBV的表达和复制.
目的 構建能抑製HBVm RNA錶達的siRNA-重組腺相關病毒(rAAV)錶達載體,觀察重組病毒對HBV的抑製作用.方法 將設計好的siRNA剋隆到骨架質粒pAAV-MC中,將該質粒與pAAV-RC和pHelper質粒共同轉染人胚腎293T細胞,進行病毒包裝.收穫併純化病毒,感染模型細胞HepG2.215,採用ELISA法和熒光定量PCR法檢測包裝的rAAV-shRNA-GFP病毒抑製HBV情況.結果 經酶切及測序證實,rAAV載體質粒pAAV-shR-NA-GFP構建成功,包裝的rAAV-shRNA-GFP病毒感染HepG2.215細胞後,可以抑製HBsAg、HBeAg的錶達和HBV的複製.結論 成功製備齣rAAV-shRNA-GFP病毒,其能夠抑製HBV的錶達和複製.
목적 구건능억제HBVm RNA표체적siRNA-중조선상관병독(rAAV)표체재체,관찰중조병독대HBV적억제작용.방법 장설계호적siRNA극륭도골가질립pAAV-MC중,장해질립여pAAV-RC화pHelper질립공동전염인배신293T세포,진행병독포장.수획병순화병독,감염모형세포HepG2.215,채용ELISA법화형광정량PCR법검측포장적rAAV-shRNA-GFP병독억제HBV정황.결과 경매절급측서증실,rAAV재체질립pAAV-shR-NA-GFP구건성공,포장적rAAV-shRNA-GFP병독감염HepG2.215세포후,가이억제HBsAg、HBeAg적표체화HBV적복제.결론 성공제비출rAAV-shRNA-GFP병독,기능구억제HBV적표체화복제.
