西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2014年
2期
163-165
,共3页
黄海东%康景佳%尹禄%管迪%张欣%李泓甫
黃海東%康景佳%尹祿%管迪%張訢%李泓甫
황해동%강경가%윤록%관적%장흔%리홍보
反义cyclinD1%基因转染%人角膜基质细胞增生
反義cyclinD1%基因轉染%人角膜基質細胞增生
반의cyclinD1%기인전염%인각막기질세포증생
Antisense cyclinD1%Gene transfection%Human corneal stromal cells%Proliferation
目的 探讨反义cyclinD1基因转染对人角膜基质细胞增生的作用效果.方法 从沈阳军区总医院眼库获取人角膜组织,体外培养获得第2代人角膜基质细胞用于实验.阳离子脂质体lipofectamine介导进行反义cyclinD1 基因转染(实验组),对照组分别为PBS替代cyclinD1质粒及lipofectamine(对照1组)和PBS代替cyclinD1质粒(对照2组).通过免疫细胞化学法统计人角膜基质细胞的cyclinD1蛋白表达情况,利用四甲基偶氮唑盐法分析人角膜基质细胞增生情况,锥虫蓝染色计算活细胞比率.结果 反义cyclinD1转染后,人角膜基质细胞仅有少量细胞核cyclinD1染色呈阳性,cyclinD1蛋白表达明显降低,A570值显著下降,与对照1组和对照2组比较,差异存在显著性(P＜0.05).对照1组和对照2组比较,差异无显著性(P＞0.05).锥虫蓝染色显示3组活细胞比率均超过90％.结论 反义cyclinD1基因转染具有抑制人角膜基质细胞增生的作用,并且细胞毒性不明显,可以作为基因治疗的相关依据.
目的 探討反義cyclinD1基因轉染對人角膜基質細胞增生的作用效果.方法 從瀋暘軍區總醫院眼庫穫取人角膜組織,體外培養穫得第2代人角膜基質細胞用于實驗.暘離子脂質體lipofectamine介導進行反義cyclinD1 基因轉染(實驗組),對照組分彆為PBS替代cyclinD1質粒及lipofectamine(對照1組)和PBS代替cyclinD1質粒(對照2組).通過免疫細胞化學法統計人角膜基質細胞的cyclinD1蛋白錶達情況,利用四甲基偶氮唑鹽法分析人角膜基質細胞增生情況,錐蟲藍染色計算活細胞比率.結果 反義cyclinD1轉染後,人角膜基質細胞僅有少量細胞覈cyclinD1染色呈暘性,cyclinD1蛋白錶達明顯降低,A570值顯著下降,與對照1組和對照2組比較,差異存在顯著性(P＜0.05).對照1組和對照2組比較,差異無顯著性(P＞0.05).錐蟲藍染色顯示3組活細胞比率均超過90％.結論 反義cyclinD1基因轉染具有抑製人角膜基質細胞增生的作用,併且細胞毒性不明顯,可以作為基因治療的相關依據.
목적 탐토반의cyclinD1기인전염대인각막기질세포증생적작용효과.방법 종침양군구총의원안고획취인각막조직,체외배양획득제2대인각막기질세포용우실험.양리자지질체lipofectamine개도진행반의cyclinD1 기인전염(실험조),대조조분별위PBS체대cyclinD1질립급lipofectamine(대조1조)화PBS대체cyclinD1질립(대조2조).통과면역세포화학법통계인각막기질세포적cyclinD1단백표체정황,이용사갑기우담서염법분석인각막기질세포증생정황,추충람염색계산활세포비솔.결과 반의cyclinD1전염후,인각막기질세포부유소량세포핵cyclinD1염색정양성,cyclinD1단백표체명현강저,A570치현저하강,여대조1조화대조2조비교,차이존재현저성(P＜0.05).대조1조화대조2조비교,차이무현저성(P＞0.05).추충람염색현시3조활세포비솔균초과90％.결론 반의cyclinD1기인전염구유억제인각막기질세포증생적작용,병차세포독성불명현,가이작위기인치료적상관의거.
