中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2014年
1期
73-76
,共4页
郭焱%瞿新明%崔健丽%吴泽民%李春莉%金宁一
郭焱%瞿新明%崔健麗%吳澤民%李春莉%金寧一
곽염%구신명%최건려%오택민%리춘리%금저일
HuZP3核心抗原%核酸疫苗%瞬时表达%免疫原性
HuZP3覈心抗原%覈痠疫苗%瞬時錶達%免疫原性
HuZP3핵심항원%핵산역묘%순시표체%면역원성
目的:构建含有组织型纤溶酶原激活剂(tPA)信号肽的人卵透明带3(HuZP3)蛋白核心抗原核酸疫苗质粒并进行体外瞬时表达.方法:将HuZP3基因用PCR方法扩增并分别引入限制性内切酶酶切位点,然后克隆入pIRESIneo载体中获得核酸疫苗质粒,经筛选鉴定后,将上述核酸疫苗质粒及空载体质粒pIRESIneo分别用脂质体瞬时转染CHO细胞,应用免疫印迹法检测核心抗原在体外CHO细胞中的表达,并将其免疫实验小鼠,以酶联免疫吸附法验证其免疫原性.结果:成功构建以pIRESIneo为载体的含tPA 信号肽的HuZP3核心抗原核酸疫苗质粒,体外瞬时表达证实含tPA信号肽的HuZP3核心抗原在CHO细胞胞内和胞外均能表达,含tPA信号肽的HuZP3核心抗原核酸疫苗质粒的核心抗原表达水平较高,核酸疫苗质粒具有很好的免疫原性.结论:以pIRESIneo为载体的含tPA信号肽的HuZP3核心抗原核酸疫苗能够将细胞内的HuZP3核心抗原分泌到细胞外,构建的核酸疫苗质粒pIRES1-ZP3/tPA具有很好的免疫原性,为进一步研究其免疫原性奠定了基础.
目的:構建含有組織型纖溶酶原激活劑(tPA)信號肽的人卵透明帶3(HuZP3)蛋白覈心抗原覈痠疫苗質粒併進行體外瞬時錶達.方法:將HuZP3基因用PCR方法擴增併分彆引入限製性內切酶酶切位點,然後剋隆入pIRESIneo載體中穫得覈痠疫苗質粒,經篩選鑒定後,將上述覈痠疫苗質粒及空載體質粒pIRESIneo分彆用脂質體瞬時轉染CHO細胞,應用免疫印跡法檢測覈心抗原在體外CHO細胞中的錶達,併將其免疫實驗小鼠,以酶聯免疫吸附法驗證其免疫原性.結果:成功構建以pIRESIneo為載體的含tPA 信號肽的HuZP3覈心抗原覈痠疫苗質粒,體外瞬時錶達證實含tPA信號肽的HuZP3覈心抗原在CHO細胞胞內和胞外均能錶達,含tPA信號肽的HuZP3覈心抗原覈痠疫苗質粒的覈心抗原錶達水平較高,覈痠疫苗質粒具有很好的免疫原性.結論:以pIRESIneo為載體的含tPA信號肽的HuZP3覈心抗原覈痠疫苗能夠將細胞內的HuZP3覈心抗原分泌到細胞外,構建的覈痠疫苗質粒pIRES1-ZP3/tPA具有很好的免疫原性,為進一步研究其免疫原性奠定瞭基礎.
목적:구건함유조직형섬용매원격활제(tPA)신호태적인란투명대3(HuZP3)단백핵심항원핵산역묘질립병진행체외순시표체.방법:장HuZP3기인용PCR방법확증병분별인입한제성내절매매절위점,연후극륭입pIRESIneo재체중획득핵산역묘질립,경사선감정후,장상술핵산역묘질립급공재체질립pIRESIneo분별용지질체순시전염CHO세포,응용면역인적법검측핵심항원재체외CHO세포중적표체,병장기면역실험소서,이매련면역흡부법험증기면역원성.결과:성공구건이pIRESIneo위재체적함tPA 신호태적HuZP3핵심항원핵산역묘질립,체외순시표체증실함tPA신호태적HuZP3핵심항원재CHO세포포내화포외균능표체,함tPA신호태적HuZP3핵심항원핵산역묘질립적핵심항원표체수평교고,핵산역묘질립구유흔호적면역원성.결론:이pIRESIneo위재체적함tPA신호태적HuZP3핵심항원핵산역묘능구장세포내적HuZP3핵심항원분비도세포외,구건적핵산역묘질립pIRES1-ZP3/tPA구유흔호적면역원성,위진일보연구기면역원성전정료기출.
