CAJ | 학술논문

目的:探讨脐带来源的MSC对B细胞生长、活化、功能、信号通路的影响,为阐明MSC对B细胞的调控以及作用机制提供理论基础.方法:以人非Hodgkin淋巴瘤B细胞系Daudi、Namalwa和Raji为研究模型,在CpG刺激和不刺激下,与脐带MSC分别共培养3天后,收集悬浮的B细胞,进行细胞计数,PI染色检测细胞周期,Annexin V染色检测凋亡;流式细胞仪检测表面免疫球蛋白、MHC分子和共刺激分子的表达,Transwell实验证明细胞接触的依赖性.实时定量PCR检测与MSC共培养6、12、24、48 h后细胞因子的mRNA水平.Western blot检测MAPK、JAK-STAT、PI3K信号通路蛋白的激活情况,抑制剂证明信号通路对细胞功能的影响.结果:MSC可阻滞Namalwa和Raji于G0/G1期,对3种B细胞系增殖和凋亡没有显著影响;显著抑制Daudi、Namalwa表面IgM的表达和3种B细胞表面CD86的表达,且抑制效应不依赖细胞接触和COX2的作用;显著上调Daudi内CCL2、COX2、IL-8的mRNA水平.但不影响TNF-α;显著激活3种细胞株上的ERK信号,ERK抑制剂可减弱MSC对Daudi表面分子和CCL2的调控.结论:MSC可阻滞B细胞系周期,通过分泌可溶性因子抑制B细胞系表面分子的活化、促进细胞因子的产生,ERK信号通路参与了MSC对B细胞系上述功能的调控,提示MSC抑制B细胞的免疫效应从而在治疗免疫疾病上发挥重要作用.
목적:탐토제대래원적MSC대B세포생장、활화、공능、신호통로적영향,위천명MSC대B세포적조공이급작용궤제제공이론기출.방법:이인비Hodgkin림파류B세포계Daudi、Namalwa화Raji위연구모형,재CpG자격화불자격하,여제대MSC분별공배양3천후,수집현부적B세포,진행세포계수,PI염색검측세포주기,Annexin V염색검측조망;류식세포의검측표면면역구단백、MHC분자화공자격분자적표체,Transwell실험증명세포접촉적의뢰성.실시정량PCR검측여MSC공배양6、12、24、48 h후세포인자적mRNA수평.Western blot검측MAPK、JAK-STAT、PI3K신호통로단백적격활정황,억제제증명신호통로대세포공능적영향.결과:MSC가조체Namalwa화Raji우G0/G1기,대3충B세포계증식화조망몰유현저영향;현저억제Daudi、Namalwa표면IgM적표체화3충B세포표면CD86적표체,차억제효응불의뢰세포접촉화COX2적작용;현저상조Daudi내CCL2、COX2、IL-8적mRNA수평.단불영향TNF-α;현저격활3충세포주상적ERK신호,ERK억제제가감약MSC대Daudi표면분자화CCL2적조공.결론:MSC가조체B세포계주기,통과분비가용성인자억제B세포계표면분자적활화、촉진세포인자적산생,ERK신호통로삼여료MSC대B세포계상술공능적조공,제시MSC억제B세포적면역효응종이재치료면역질병상발휘중요작용.