CAJ | 학술논문

目的观察室颤致心脏骤停猪复苏存活24 h后心室心肌细胞肌节排列和细胞间闰盘结构的变化,探讨钙蛋白酶(Calpain)对心肌超微结构的影响及通过调节缝隙连接蛋白43(Cx43)影响心肌信号传导通路的机制.方法健康家猪14只,随机分为假手术组(n=5)和复苏组(n=9).复苏组经电刺激建立猪心脏骤停模型,室颤9 min后进行胸外按压CPR,复苏成功5只,存活24 h处死,取心室肌游离壁.透射电镜观察超微结构变化,免疫荧光法观察Cx43表达水平和分布的变化;RT-PCR检测Cx43和Calpain mRNA水平;Western Blot检测p-Cx43、Cx43和Calpain的蛋白表达改变.结果与假手术组比较,复苏组心肌纤维、肌节排列和闰盘分布较紊乱;心肌细胞间Cx43端-端分布减少、侧-侧分布增多;复苏组Calpain mRNA及蛋白水平均明显增高(P<0.01),Cx43 mRNA及蛋白水平均明显降低(P<0.01),p-Cx43蛋白水平明显降低(P<0.01);p-Cx43/Cx43差异无统计学意义(P>0.05).结论心脏骤停复苏猪心肌Calpain mRNA水平及蛋白表达的增高,促进了对结构蛋白的分解,造成心肌纤维排列异常,同时影响了缝隙连接内Cx43的表达及分布,而通过总Cx43中p-Cx43水平的增加,复苏后心肌细胞间缝隙连接有代偿性的功能恢复.
목적 관찰실전치심장취정저복소존활24 h후심실심기세포기절배렬화세포간윤반결구적변화,탐토개단백매(Calpain)대심기초미결구적영향급통과조절봉극련접단백43(Cx43)영향심기신호전도통로적궤제.방법 건강가저14지,수궤분위가수술조(n=5)화복소조(n=9).복소조경전자격건립저심장취정모형,실전9 min후진행흉외안압CPR,복소성공5지,존활24 h처사,취심실기유리벽.투사전경관찰초미결구변화,면역형광법관찰Cx43표체수평화분포적변화;RT-PCR검측Cx43화Calpain mRNA수평;Western Blot검측p-Cx43、Cx43화Calpain적단백표체개변.결과 여가수술조비교,복소조심기섬유、기절배렬화윤반분포교문란;심기세포간Cx43단-단분포감소、측-측분포증다;복소조Calpain mRNA급단백수평균명현증고(P<0.01),Cx43 mRNA급단백수평균명현강저(P<0.01),p-Cx43단백수평명현강저(P<0.01);p-Cx43/Cx43차이무통계학의의(P>0.05).결론 심장취정복소저심기Calpain mRNA수평급단백표체적증고,촉진료대결구단백적분해,조성심기섬유배렬이상,동시영향료봉극련접내Cx43적표체급분포,이통과총Cx43중p-Cx43수평적증가,복소후심기세포간봉극련접유대상성적공능회복.