遵义医学院学报
遵義醫學院學報
준의의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE ZUNYI
2014年
1期
81-85
,共5页
朱蓉%赵逵%方兴国%狄连君%陈小燕
硃蓉%趙逵%方興國%狄連君%陳小燕
주용%조규%방흥국%적련군%진소연
Ascl2%结肠癌细胞%小动物活体成像
Ascl2%結腸癌細胞%小動物活體成像
Ascl2%결장암세포%소동물활체성상
目的 小动物活体成像直观观察转录因子Ascl2对结肠癌HT-29细胞裸鼠移植瘤生长的影响.方法 构建Ascl2的shRNA干扰质粒,对人结肠癌HT-29细胞进行瞬时转染48 h,G418筛选、克隆挑取、扩增培养建立稳定转染的细胞系,采用小动物活体成像仪直观观察Ascl2-RNAi对裸鼠移植瘤生长的影响.结果 成功构建Ascl2的shRNA干扰质粒,并进行测序验证;质粒转染HT-29细胞,经G418筛选后挑选稳定转染的克隆,进行扩增培养,成功建立稳定转染的细胞系,命名为shRNA-Ascl2/HT-29和shRNA-control/HT-29细胞,并采用Western-blot证实干扰效果(P<0.01);采用小动物活体成像仪直观观察发现Ascl2-RNAi抑制HT-29细胞裸鼠移植瘤的生长.结论 Ascl2-RNAi导致结肠癌HT-29细胞体外致瘤能力下降,小动物活体成像技术直观、灵敏度高、实验成本低,值得进一步推广应用.
目的 小動物活體成像直觀觀察轉錄因子Ascl2對結腸癌HT-29細胞裸鼠移植瘤生長的影響.方法 構建Ascl2的shRNA榦擾質粒,對人結腸癌HT-29細胞進行瞬時轉染48 h,G418篩選、剋隆挑取、擴增培養建立穩定轉染的細胞繫,採用小動物活體成像儀直觀觀察Ascl2-RNAi對裸鼠移植瘤生長的影響.結果 成功構建Ascl2的shRNA榦擾質粒,併進行測序驗證;質粒轉染HT-29細胞,經G418篩選後挑選穩定轉染的剋隆,進行擴增培養,成功建立穩定轉染的細胞繫,命名為shRNA-Ascl2/HT-29和shRNA-control/HT-29細胞,併採用Western-blot證實榦擾效果(P<0.01);採用小動物活體成像儀直觀觀察髮現Ascl2-RNAi抑製HT-29細胞裸鼠移植瘤的生長.結論 Ascl2-RNAi導緻結腸癌HT-29細胞體外緻瘤能力下降,小動物活體成像技術直觀、靈敏度高、實驗成本低,值得進一步推廣應用.
목적 소동물활체성상직관관찰전록인자Ascl2대결장암HT-29세포라서이식류생장적영향.방법 구건Ascl2적shRNA간우질립,대인결장암HT-29세포진행순시전염48 h,G418사선、극륭도취、확증배양건립은정전염적세포계,채용소동물활체성상의직관관찰Ascl2-RNAi대라서이식류생장적영향.결과 성공구건Ascl2적shRNA간우질립,병진행측서험증;질립전염HT-29세포,경G418사선후도선은정전염적극륭,진행확증배양,성공건립은정전염적세포계,명명위shRNA-Ascl2/HT-29화shRNA-control/HT-29세포,병채용Western-blot증실간우효과(P<0.01);채용소동물활체성상의직관관찰발현Ascl2-RNAi억제HT-29세포라서이식류적생장.결론 Ascl2-RNAi도치결장암HT-29세포체외치류능력하강,소동물활체성상기술직관、령민도고、실험성본저,치득진일보추엄응용.