肾脏病与透析肾移植杂志
腎髒病與透析腎移植雜誌
신장병여투석신이식잡지
CHINESE JOURNAL OF NEPHROLOGY,DIALYSIS & TRANSPLANTATION
2014年
1期
42-47
,共6页
高雪静%唐莎%尹仕伟%张莹%谢京%施维维%王莉%邹丽云%牟芝蓉
高雪靜%唐莎%尹仕偉%張瑩%謝京%施維維%王莉%鄒麗雲%牟芝蓉
고설정%당사%윤사위%장형%사경%시유유%왕리%추려운%모지용
血管紧张素Ⅱ%自噬%Rho激酶%足细胞%3-甲基腺嘌呤
血管緊張素Ⅱ%自噬%Rho激酶%足細胞%3-甲基腺嘌呤
혈관긴장소Ⅱ%자서%Rho격매%족세포%3-갑기선표령
Angiotensin Ⅱ%autophagy%Rho-kinase%podocytes%3-methyladenine
目的:探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人足细胞(AB 8/13)自噬的影响. 方法:体外培养人足细胞株,采用不同浓度的AngⅡ(10-8～10-6 mol/L)刺激人足细胞24h和固定浓度AngⅡ(10-7moVL)刺激不同时间(0h、6h、12h、24h、36h),以及特异性自噬阻断剂3-MA(5 mmol/L)和不同浓度(10-8～1O-6mol/L)法舒地尔进行干预.免疫荧光法和Westem印迹法检测自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、Beclin-1]的表达变化. 结果:AngⅡ可刺激足细胞LC3B、Beclin-1蛋白表达上调,且呈剂量、时间依赖性(P＜0.05),在浓度10-7mol/L AngⅡ和时间24h时达高峰.3-甲基腺嘌呤(3-MA)能明显降低AngⅡ引起的LC3B蛋白表达(P＜0.01).法舒地尔本身对足细胞自噬没有影响,但可以明显下调AngⅡ诱导的足细胞LC3B和Beclin-1蛋白表达(P＜0.05),10-7mol/L时效果最明显. 结论:AngⅡ可诱导人足细胞自噬增强,3-MA和法舒地尔均可抑制此过程的发生,提示Rho激酶途径可能参与了AngⅡ诱导的足细胞自噬过程.
目的:探討Rho激酶抑製劑法舒地爾對血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)誘導人足細胞(AB 8/13)自噬的影響. 方法:體外培養人足細胞株,採用不同濃度的AngⅡ(10-8～10-6 mol/L)刺激人足細胞24h和固定濃度AngⅡ(10-7moVL)刺激不同時間(0h、6h、12h、24h、36h),以及特異性自噬阻斷劑3-MA(5 mmol/L)和不同濃度(10-8～1O-6mol/L)法舒地爾進行榦預.免疫熒光法和Westem印跡法檢測自噬相關蛋白[微管相關蛋白1輕鏈3B(LC3B)、Beclin-1]的錶達變化. 結果:AngⅡ可刺激足細胞LC3B、Beclin-1蛋白錶達上調,且呈劑量、時間依賴性(P＜0.05),在濃度10-7mol/L AngⅡ和時間24h時達高峰.3-甲基腺嘌呤(3-MA)能明顯降低AngⅡ引起的LC3B蛋白錶達(P＜0.01).法舒地爾本身對足細胞自噬沒有影響,但可以明顯下調AngⅡ誘導的足細胞LC3B和Beclin-1蛋白錶達(P＜0.05),10-7mol/L時效果最明顯. 結論:AngⅡ可誘導人足細胞自噬增彊,3-MA和法舒地爾均可抑製此過程的髮生,提示Rho激酶途徑可能參與瞭AngⅡ誘導的足細胞自噬過程.
목적:탐토Rho격매억제제법서지이대혈관긴장소Ⅱ(AngⅡ)유도인족세포(AB 8/13)자서적영향. 방법:체외배양인족세포주,채용불동농도적AngⅡ(10-8～10-6 mol/L)자격인족세포24h화고정농도AngⅡ(10-7moVL)자격불동시간(0h、6h、12h、24h、36h),이급특이성자서조단제3-MA(5 mmol/L)화불동농도(10-8～1O-6mol/L)법서지이진행간예.면역형광법화Westem인적법검측자서상관단백[미관상관단백1경련3B(LC3B)、Beclin-1]적표체변화. 결과:AngⅡ가자격족세포LC3B、Beclin-1단백표체상조,차정제량、시간의뢰성(P＜0.05),재농도10-7mol/L AngⅡ화시간24h시체고봉.3-갑기선표령(3-MA)능명현강저AngⅡ인기적LC3B단백표체(P＜0.01).법서지이본신대족세포자서몰유영향,단가이명현하조AngⅡ유도적족세포LC3B화Beclin-1단백표체(P＜0.05),10-7mol/L시효과최명현. 결론:AngⅡ가유도인족세포자서증강,3-MA화법서지이균가억제차과정적발생,제시Rho격매도경가능삼여료AngⅡ유도적족세포자서과정.
