林业调查规划
林業調查規劃
임업조사규화
FOREST INVENTORY AND PLANNING
2014年
1期
14-17
,共4页
周林涛%陆斌%周军%苏为耿%原晓龙%孟富宣
週林濤%陸斌%週軍%囌為耿%原曉龍%孟富宣
주림도%륙빈%주군%소위경%원효룡%맹부선
漾濞泡核桃%ISSR-PCR反应体系%正交优化%扩增效果
漾濞泡覈桃%ISSR-PCR反應體繫%正交優化%擴增效果
양비포핵도%ISSR-PCR반응체계%정교우화%확증효과
Juglans sigillata%ISSR-PCR reaction system%orthogonal optimization%amplification effect
以漾濞泡核桃优株为研究对象，研究其ISSR-PCR反应体系中的5个影响因子（模板DNA浓度、Taq DNA 聚合酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2＋浓度）对PCR扩增效果的影响，从而建立起漾濞泡核桃的最佳ISSR-PCR反应体系。结果表明：模板DNA最佳浓度为50 ng/（25μL），Taq聚合酶浓度为0.75U/（25μL），引物浓度为0.7mmol/L，dNTPs浓度为0.20mmol/L，Mg2＋浓度为2.0mmol/L，利用该最佳体系对试验中所选取的样本进行扩增反应。建立了适宜于漾濞泡核桃的ISSR-PCR扩增的最佳体系，该体系的建立为利用ISSR分子标记技术对漾濞泡核桃进行种质资源研究奠定了基础。
以漾濞泡覈桃優株為研究對象，研究其ISSR-PCR反應體繫中的5箇影響因子（模闆DNA濃度、Taq DNA 聚閤酶濃度、引物濃度、dNTPs濃度、Mg2＋濃度）對PCR擴增效果的影響，從而建立起漾濞泡覈桃的最佳ISSR-PCR反應體繫。結果錶明：模闆DNA最佳濃度為50 ng/（25μL），Taq聚閤酶濃度為0.75U/（25μL），引物濃度為0.7mmol/L，dNTPs濃度為0.20mmol/L，Mg2＋濃度為2.0mmol/L，利用該最佳體繫對試驗中所選取的樣本進行擴增反應。建立瞭適宜于漾濞泡覈桃的ISSR-PCR擴增的最佳體繫，該體繫的建立為利用ISSR分子標記技術對漾濞泡覈桃進行種質資源研究奠定瞭基礎。
이양비포핵도우주위연구대상，연구기ISSR-PCR반응체계중적5개영향인자（모판DNA농도、Taq DNA 취합매농도、인물농도、dNTPs농도、Mg2＋농도）대PCR확증효과적영향，종이건립기양비포핵도적최가ISSR-PCR반응체계。결과표명：모판DNA최가농도위50 ng/（25μL），Taq취합매농도위0.75U/（25μL），인물농도위0.7mmol/L，dNTPs농도위0.20mmol/L，Mg2＋농도위2.0mmol/L，이용해최가체계대시험중소선취적양본진행확증반응。건립료괄의우양비포핵도적ISSR-PCR확증적최가체계，해체계적건립위이용ISSR분자표기기술대양비포핵도진행충질자원연구전정료기출。
The effects of template DNA concentrations , Taq DNA polymerase concentrations , primers concentrations , dNTPs and Mg2+concentrations in ISSR-PCR reaction system on PCR amplification have been studied , and optimum ISSR-PCR reaction system was set up.Results showed that the most suitable concentrations of template DNA, Taq DNA polymerase, primers, dNTPs and Mg2+ were 50ng/(25μL), 0.75U/(25μL), 0.7mmol/L, 0.20mmol/L and 2.0mmol/L respectively.The optimal IS-SR-PCR reaction system for Juglans sigillata established in this research provides a basis for using ISSR molecular marker technology to study the germplasm resources of Juglans sigillata.
