CAJ | 학술논문

鸭源新城疫F基因和鸭圆环病毒Cap基因融合表达DNA疫苗的构建
압원신성역F기인화압원배병독Cap기인융합표체DNA역묘적구건
Construction of Recombinant Plasmid Coexpressing Cap Gene of Duck Circovirus and F Gene of NDV Isolated from Duck

万方数据

西南农业学报西南農業學報 서남농업학보
SOUTHWEST CHINA JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2014年 1期 423-427 ,共5页

许宗丽%谢芝勋%谢丽基%刘加波%邓显文%谢志勤%庞耀珊%范晴%罗思思

허종려%사지훈%사려기%류가파%산현문%사지근%방요산%범청%라사사

新城疫病毒%鸭圆环病毒%DNA疫苗%免疫试验新城疫病毒%鴨圓環病毒%DNA疫苗%免疫試驗
신성역병독%압원배병독%DNA역묘%면역시험
Newcastle disease virus%Duck circovirus%DNA vaccine%Immunization test

设计了2对特异性引物,PCR扩增出鸭源NDV分离株GX2011/19的F基因和DuCV的Gap基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1,成功构建重组融合表达质粒pcDNA3.1-F-Cap.经酶切和测序鉴定正确后,将重组质粒pcDNA3.1-F-Cap转染Vero细胞,采用间接免疫荧光检测到目的基因的体外表达.将pcDNA3.1-F-Cap作为DNA疫苗对2周龄的SPF雏鸭以胸部肌肉多点注射的方式进行免疫.分3个实验组,每组接种剂量分别为100、200和300μg/只,另设2组为载体质粒空白组和灭活疫苗组.ELISA检测抗体水平,试验结果显示:各DNA疫苗免疫组的NDV抗体和DuCV抗体水平明显高于载体空白对照组,差异显著(P＜0.05);二免后不同DNA剂量组间的抗体水平随着免疫剂量的增大而增加,差异显著(P＜0.05);于第二次免疫后2周,使用分离株GX2011/19以滴鼻的方式进行攻毒试验.接种pcDNA3.1-F-Cap剂量为300μg/只免疫组的保护率为40％,高于200μg/只组(30％)和100μg/只组(10％).研究结果表明,构建的DNA疫苗对新城疫病毒的强毒攻击具有一定的抵抗力,此疫苗的保护率随着免疫剂量的增大而有所增加.
설계료2대특이성인물,PCR확증출압원NDV분리주GX2011/19적F기인화DuCV적Gap기인,병장기극륭도진핵표체재체pcDNA3.1,성공구건중조융합표체질립pcDNA3.1-F-Cap.경매절화측서감정정학후,장중조질립pcDNA3.1-F-Cap전염Vero세포,채용간접면역형광검측도목적기인적체외표체.장pcDNA3.1-F-Cap작위DNA역묘대2주령적SPF추압이흉부기육다점주사적방식진행면역.분3개실험조,매조접충제량분별위100、200화300μg/지,령설2조위재체질립공백조화멸활역묘조.ELISA검측항체수평,시험결과현시:각DNA역묘면역조적NDV항체화DuCV항체수평명현고우재체공백대조조,차이현저(P＜0.05);이면후불동DNA제량조간적항체수평수착면역제량적증대이증가,차이현저(P＜0.05);우제이차면역후2주,사용분리주GX2011/19이적비적방식진행공독시험.접충pcDNA3.1-F-Cap제량위300μg/지면역조적보호솔위40％,고우200μg/지조(30％)화100μg/지조(10％).연구결과표명,구건적DNA역묘대신성역병독적강독공격구유일정적저항력,차역묘적보호솔수착면역제량적증대이유소증가.