华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2013年
6期
71-76
,共6页
胡博%滕蔓%禹乐乐%罗俊%迟佳琪%宿靖伟%柴书军%张改平
鬍博%滕蔓%禹樂樂%囉俊%遲佳琪%宿靖偉%柴書軍%張改平
호박%등만%우악악%라준%지가기%숙정위%시서군%장개평
乙脑病毒%BSF.ZZ-1%BSF.ZZ-3%BHK-21细胞系%传代培养%E基因%序列分析
乙腦病毒%BSF.ZZ-1%BSF.ZZ-3%BHK-21細胞繫%傳代培養%E基因%序列分析
을뇌병독%BSF.ZZ-1%BSF.ZZ-3%BHK-21세포계%전대배양%E기인%서렬분석
JEV%BSF.ZZ-1%BSF.ZZ-3%BHK-21 cell line%Serial subcultivation%E gene%Sequence analysis
为研究猪乙脑病毒( JEV)分离株遗传基因的稳定性,将JEV分离株BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3在BHK-21细胞上进行连续传代培养,并对其E基因的遗传稳定性进行了研究。结果表明,经连续传代60次后病毒E基因趋于稳定,BSF.ZZ-1毒株E蛋白氨基酸位点E21(A→V)、E200(T→A)、E244(G→E)、E279(M→K)和E426(G→D),以及BSF.ZZ-3毒株的E244(G→E)、E255(F→L)、E285(M→L)、E368(L→S)和E497(N→S)传代后发生稳定点突变。与JEV毒力相关的部分位点如E107、E138、E176、E177和E315遗传稳定性较高,经连续传代后均未发生突变,与疫苗株SA14-14-2相应位点完全一致。但是,另外一些位点的遗传稳定性较差,如BSF.ZZ-3的E279(M→K→M)出现反复突变。这些突变是否与JEV的宿主细胞适应性及毒力变化相关有待进一步研究。
為研究豬乙腦病毒( JEV)分離株遺傳基因的穩定性,將JEV分離株BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3在BHK-21細胞上進行連續傳代培養,併對其E基因的遺傳穩定性進行瞭研究。結果錶明,經連續傳代60次後病毒E基因趨于穩定,BSF.ZZ-1毒株E蛋白氨基痠位點E21(A→V)、E200(T→A)、E244(G→E)、E279(M→K)和E426(G→D),以及BSF.ZZ-3毒株的E244(G→E)、E255(F→L)、E285(M→L)、E368(L→S)和E497(N→S)傳代後髮生穩定點突變。與JEV毒力相關的部分位點如E107、E138、E176、E177和E315遺傳穩定性較高,經連續傳代後均未髮生突變,與疫苗株SA14-14-2相應位點完全一緻。但是,另外一些位點的遺傳穩定性較差,如BSF.ZZ-3的E279(M→K→M)齣現反複突變。這些突變是否與JEV的宿主細胞適應性及毒力變化相關有待進一步研究。
위연구저을뇌병독( JEV)분리주유전기인적은정성,장JEV분리주BSF.ZZ-1화BSF.ZZ-3재BHK-21세포상진행련속전대배양,병대기E기인적유전은정성진행료연구。결과표명,경련속전대60차후병독E기인추우은정,BSF.ZZ-1독주E단백안기산위점E21(A→V)、E200(T→A)、E244(G→E)、E279(M→K)화E426(G→D),이급BSF.ZZ-3독주적E244(G→E)、E255(F→L)、E285(M→L)、E368(L→S)화E497(N→S)전대후발생은정점돌변。여JEV독력상관적부분위점여E107、E138、E176、E177화E315유전은정성교고,경련속전대후균미발생돌변,여역묘주SA14-14-2상응위점완전일치。단시,령외일사위점적유전은정성교차,여BSF.ZZ-3적E279(M→K→M)출현반복돌변。저사돌변시부여JEV적숙주세포괄응성급독력변화상관유대진일보연구。
In this paper ,the genetic stability of E gene of JEV isolates BSF .ZZ-1 and BSF .ZZ-3 passaged in BHK-21 cells(Baby hamster kidney cell line ) was studied.The results showed that the E gene is becoming stable after 60 passages in BHK-21 cells.After serial sucultivation,stable amino acid(aa) mutation happened at the sites E21(F→L),E200(T→A),E244(G→E),E279(N→S) and E426(G→D) in isolate BSF.ZZ-1 and sites E244 (G→E),E255(F→L),E285(M→L),E368(L→S) and E97(N→S) in isolate BSF.ZZ-3.No mutations were ob-served at part of the virulence correlated aa sites ,such as E107,E138,E176,E177 and E315,similar to those of vaccine strain SA14-14-2.However,mutations at the virulence correlated aa sites of E279(M→K→M)of BSF.ZZ-3 happened repeatedly .Whether these mutations are correlated with the virulence variation and adaptability of JEV to host cells needs to be further studied .