中华危重病急救医学
中華危重病急救醫學
중화위중병급구의학
Chinese Critical Care Medicine
2014年
2期
84-88
,共5页
汪首振%汤展宏%胡军涛%蒋良艳%尹祥
汪首振%湯展宏%鬍軍濤%蔣良豔%尹祥
왕수진%탕전굉%호군도%장량염%윤상
亚低温%脂多糖%巨噬细胞%Toll样受体4
亞低溫%脂多糖%巨噬細胞%Toll樣受體4
아저온%지다당%거서세포%Toll양수체4
Hypothermia%Lipopolysaccharide%Macrophage%Toll-like receptor 4
目的 探讨亚低温对脂多糖(LPS)刺激下巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)mRNA转录及下游炎症平衡的影响.方法 实验用RAW264.7小鼠巨噬细胞株,将细胞分别置于37 ℃和32℃的温育箱中培养,干预组加入10 ng/mL LPS进行刺激,对照组加入等量生理盐水.分别于培养2、8、24h取细胞上清液检测白细胞介素(IL-1β、IL-10)水平;用TRIzol提取细胞总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR4 mRNA的转录水平.结果 LPS刺激下,常温组和亚低温组TLR4 mRNA表达水平均呈先升高、后降低的趋势(均P＜ 0.001);同一时间点,亚低温组TLR4 mRNA表达水平(2-AAC)均明显低于常温组(2 h:9.19 ±0.57比10.08±1.02,t=-2.285,P=0.036;8 h:13.58±1.57比15.24±1.63,t=-2.201,P=0.042;24 h:6.85±1.17比8.17±1.21,t=2.353,P=0.032).LPS刺激下,常温组和亚低温组随时间延长IL-1β、IL-10均逐步增高(均P＜0.001);同一时间点,亚低温组IL-1β(ng/L)明显低于常温组(2 h:87.08±29.35比110.53±26.58,t=1.777,P=0.047;8 h:119.19±49.14比173.25±37.21,t=2.631,P=0.018;24 h:208.66±53.83比346.56±64.30,f =4.933,P＜0.001);IL-10(ng/L)明显高于常温组(8 h:170.01±24.90比140.02±15.08,t=-3.091,P=0.007;24 h:423.10±52.40比165.06±31.97,t=-12.611,P＜0.001).随着LPS刺激时间的延长,常温组IL-1B/IL-10比值逐渐升高(F=20.003,P＜0.001),亚低温组IL-1 β/IL-10比值则逐渐降低(F=1.811,P=0.185);同一时间点,亚低温组IL-1WIL-10比值明显低于常温组(2h:0.740±0.214比0.993±0.256,t=2.275,P=0.037;8 h:0.701±0.363比1.237±0.455,t=2.763,P=0.014;24 h:0.493±0.292比2.099±0.428,t=9.299,P＜0.001).结论 亚低温可以降低LPS刺激下巨噬细胞TLR4 mRNA的转录水平,相对降低IL-1β水平,但保留了更高水平的IL-10,使炎症平衡向抗炎方向发展.
目的 探討亞低溫對脂多糖(LPS)刺激下巨噬細胞Toll樣受體4(TLR4)mRNA轉錄及下遊炎癥平衡的影響.方法 實驗用RAW264.7小鼠巨噬細胞株,將細胞分彆置于37 ℃和32℃的溫育箱中培養,榦預組加入10 ng/mL LPS進行刺激,對照組加入等量生理鹽水.分彆于培養2、8、24h取細胞上清液檢測白細胞介素(IL-1β、IL-10)水平;用TRIzol提取細胞總RNA,逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測TLR4 mRNA的轉錄水平.結果 LPS刺激下,常溫組和亞低溫組TLR4 mRNA錶達水平均呈先升高、後降低的趨勢(均P＜ 0.001);同一時間點,亞低溫組TLR4 mRNA錶達水平(2-AAC)均明顯低于常溫組(2 h:9.19 ±0.57比10.08±1.02,t=-2.285,P=0.036;8 h:13.58±1.57比15.24±1.63,t=-2.201,P=0.042;24 h:6.85±1.17比8.17±1.21,t=2.353,P=0.032).LPS刺激下,常溫組和亞低溫組隨時間延長IL-1β、IL-10均逐步增高(均P＜0.001);同一時間點,亞低溫組IL-1β(ng/L)明顯低于常溫組(2 h:87.08±29.35比110.53±26.58,t=1.777,P=0.047;8 h:119.19±49.14比173.25±37.21,t=2.631,P=0.018;24 h:208.66±53.83比346.56±64.30,f =4.933,P＜0.001);IL-10(ng/L)明顯高于常溫組(8 h:170.01±24.90比140.02±15.08,t=-3.091,P=0.007;24 h:423.10±52.40比165.06±31.97,t=-12.611,P＜0.001).隨著LPS刺激時間的延長,常溫組IL-1B/IL-10比值逐漸升高(F=20.003,P＜0.001),亞低溫組IL-1 β/IL-10比值則逐漸降低(F=1.811,P=0.185);同一時間點,亞低溫組IL-1WIL-10比值明顯低于常溫組(2h:0.740±0.214比0.993±0.256,t=2.275,P=0.037;8 h:0.701±0.363比1.237±0.455,t=2.763,P=0.014;24 h:0.493±0.292比2.099±0.428,t=9.299,P＜0.001).結論 亞低溫可以降低LPS刺激下巨噬細胞TLR4 mRNA的轉錄水平,相對降低IL-1β水平,但保留瞭更高水平的IL-10,使炎癥平衡嚮抗炎方嚮髮展.
목적 탐토아저온대지다당(LPS)자격하거서세포Toll양수체4(TLR4)mRNA전록급하유염증평형적영향.방법 실험용RAW264.7소서거서세포주,장세포분별치우37 ℃화32℃적온육상중배양,간예조가입10 ng/mL LPS진행자격,대조조가입등량생리염수.분별우배양2、8、24h취세포상청액검측백세포개소(IL-1β、IL-10)수평;용TRIzol제취세포총RNA,역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측TLR4 mRNA적전록수평.결과 LPS자격하,상온조화아저온조TLR4 mRNA표체수평균정선승고、후강저적추세(균P＜ 0.001);동일시간점,아저온조TLR4 mRNA표체수평(2-AAC)균명현저우상온조(2 h:9.19 ±0.57비10.08±1.02,t=-2.285,P=0.036;8 h:13.58±1.57비15.24±1.63,t=-2.201,P=0.042;24 h:6.85±1.17비8.17±1.21,t=2.353,P=0.032).LPS자격하,상온조화아저온조수시간연장IL-1β、IL-10균축보증고(균P＜0.001);동일시간점,아저온조IL-1β(ng/L)명현저우상온조(2 h:87.08±29.35비110.53±26.58,t=1.777,P=0.047;8 h:119.19±49.14비173.25±37.21,t=2.631,P=0.018;24 h:208.66±53.83비346.56±64.30,f =4.933,P＜0.001);IL-10(ng/L)명현고우상온조(8 h:170.01±24.90비140.02±15.08,t=-3.091,P=0.007;24 h:423.10±52.40비165.06±31.97,t=-12.611,P＜0.001).수착LPS자격시간적연장,상온조IL-1B/IL-10비치축점승고(F=20.003,P＜0.001),아저온조IL-1 β/IL-10비치칙축점강저(F=1.811,P=0.185);동일시간점,아저온조IL-1WIL-10비치명현저우상온조(2h:0.740±0.214비0.993±0.256,t=2.275,P=0.037;8 h:0.701±0.363비1.237±0.455,t=2.763,P=0.014;24 h:0.493±0.292비2.099±0.428,t=9.299,P＜0.001).결론 아저온가이강저LPS자격하거서세포TLR4 mRNA적전록수평,상대강저IL-1β수평,단보류료경고수평적IL-10,사염증평형향항염방향발전.
