中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2014年
4期
154-158
,共5页
闫春林%程月发%吴庆文%赵素晨%郝小惠
閆春林%程月髮%吳慶文%趙素晨%郝小惠
염춘림%정월발%오경문%조소신%학소혜
帕金森病%葛根素%p53%1-甲基-4-苯基-吡啶离子%细胞凋亡
帕金森病%葛根素%p53%1-甲基-4-苯基-吡啶離子%細胞凋亡
파금삼병%갈근소%p53%1-갑기-4-분기-필정리자%세포조망
Parkinson's disease%puerarin%p53%1-methyl-4-phenylpyridinium iodide%apoptosis
目的:探讨1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡过程中p53及其上下游相关基因的变化情况,并探讨葛根素干预的保护作用.方法:体外培养SH-SY5Y细胞株,待细胞密度达到70％融合后,用终浓度分别为50,100,150 μmol·L-的葛根素预先作用3h后加入1 mmol·L-的MPP+继续培养,第48 h采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,第24 h采用Annexin-V/PI流式细胞分析术检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术分析p53及其相关基因mRNA表达量变化.结果:MTT结果显示葛根素预处理的细胞比单纯MPP+处理的细胞存活率有显著性增加(P＜0.05),说明葛根素对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞具有保护作用且呈一定的剂量依赖性;Annexin-V/PI流式细胞分析术检测结果表明葛根素可以降低MPP+诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡率;RT-PCR结果显示MPP+诱导可以增加SH-SY5Y细胞的p53mRNA表达;葛根素预处理下调了p53及其相关基因p21,Bax,Caspase-3的mRNA的表达,上调了p53负调节因子MDM2和凋亡抑制基因Bcl-2的mRNA的表达.结论:MPP+诱导可以导致SH-SY5Y细胞的p53 mRNA增加;葛根素可以通过调节p53及其相关基因的表达对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞发挥保护作用.
目的:探討1-甲基-4-苯基-吡啶離子(MPP+)誘導人神經母細胞瘤(SH-SY5Y)細胞凋亡過程中p53及其上下遊相關基因的變化情況,併探討葛根素榦預的保護作用.方法:體外培養SH-SY5Y細胞株,待細胞密度達到70％融閤後,用終濃度分彆為50,100,150 μmol·L-的葛根素預先作用3h後加入1 mmol·L-的MPP+繼續培養,第48 h採用噻唑藍(MTT)法測定細胞存活率,第24 h採用Annexin-V/PI流式細胞分析術檢測細胞凋亡率,實時熒光定量PCR(RT-PCR)技術分析p53及其相關基因mRNA錶達量變化.結果:MTT結果顯示葛根素預處理的細胞比單純MPP+處理的細胞存活率有顯著性增加(P＜0.05),說明葛根素對MPP+誘導的SH-SY5Y細胞具有保護作用且呈一定的劑量依賴性;Annexin-V/PI流式細胞分析術檢測結果錶明葛根素可以降低MPP+誘導的SH-SY5Y細胞的凋亡率;RT-PCR結果顯示MPP+誘導可以增加SH-SY5Y細胞的p53mRNA錶達;葛根素預處理下調瞭p53及其相關基因p21,Bax,Caspase-3的mRNA的錶達,上調瞭p53負調節因子MDM2和凋亡抑製基因Bcl-2的mRNA的錶達.結論:MPP+誘導可以導緻SH-SY5Y細胞的p53 mRNA增加;葛根素可以通過調節p53及其相關基因的錶達對MPP+誘導的SH-SY5Y細胞髮揮保護作用.
목적:탐토1-갑기-4-분기-필정리자(MPP+)유도인신경모세포류(SH-SY5Y)세포조망과정중p53급기상하유상관기인적변화정황,병탐토갈근소간예적보호작용.방법:체외배양SH-SY5Y세포주,대세포밀도체도70％융합후,용종농도분별위50,100,150 μmol·L-적갈근소예선작용3h후가입1 mmol·L-적MPP+계속배양,제48 h채용새서람(MTT)법측정세포존활솔,제24 h채용Annexin-V/PI류식세포분석술검측세포조망솔,실시형광정량PCR(RT-PCR)기술분석p53급기상관기인mRNA표체량변화.결과:MTT결과현시갈근소예처리적세포비단순MPP+처리적세포존활솔유현저성증가(P＜0.05),설명갈근소대MPP+유도적SH-SY5Y세포구유보호작용차정일정적제량의뢰성;Annexin-V/PI류식세포분석술검측결과표명갈근소가이강저MPP+유도적SH-SY5Y세포적조망솔;RT-PCR결과현시MPP+유도가이증가SH-SY5Y세포적p53mRNA표체;갈근소예처리하조료p53급기상관기인p21,Bax,Caspase-3적mRNA적표체,상조료p53부조절인자MDM2화조망억제기인Bcl-2적mRNA적표체.결론:MPP+유도가이도치SH-SY5Y세포적p53 mRNA증가;갈근소가이통과조절p53급기상관기인적표체대MPP+유도적SH-SY5Y세포발휘보호작용.
