新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
12期
2280-2285
,共6页
陈竞%苏艳%冯蕾%杨新平%秦新政%古丽·艾合买提
陳競%囌豔%馮蕾%楊新平%秦新政%古麗·艾閤買提
진경%소염%풍뢰%양신평%진신정%고려·애합매제
沼液%总DNA提取%优化%PCR-DGGE检测
沼液%總DNA提取%優化%PCR-DGGE檢測
소액%총DNA제취%우화%PCR-DGGE검측
biogas slurry%total DNA extraction%optimization%PCR-DGGE detection
[目的]目前沼液污泥中99％的微生物不可培养的,为开展羊粪沼液中微生物多样性的研究,须对沼液总DNA进行提取.[方法]研究以总DNA及其PCR产物的琼脂糖电泳结果为判定依据,以SDS结合酚氯仿抽提总DNA的方法为基础,采用逐步增加净化菌泥、溶菌酶裂解以及DNA纯化等优化方法,并测定优化效果.[结果]后续增加的步骤对提高总DNA的提取效率及质量十分有效,所得DNA在得率、大小以及纯净度方面都有所提高,可以满足后续分子实验的要求.[结论]以SDS法为基础,用TENP和PBS洗涤菌泥,添加适量溶菌酶,并适当延长反应时间至3h,再经纯化柱吸附和洗脱的方法可以获得更高质量的羊粪沼液总DNA.
[目的]目前沼液汙泥中99％的微生物不可培養的,為開展羊糞沼液中微生物多樣性的研究,鬚對沼液總DNA進行提取.[方法]研究以總DNA及其PCR產物的瓊脂糖電泳結果為判定依據,以SDS結閤酚氯倣抽提總DNA的方法為基礎,採用逐步增加淨化菌泥、溶菌酶裂解以及DNA純化等優化方法,併測定優化效果.[結果]後續增加的步驟對提高總DNA的提取效率及質量十分有效,所得DNA在得率、大小以及純淨度方麵都有所提高,可以滿足後續分子實驗的要求.[結論]以SDS法為基礎,用TENP和PBS洗滌菌泥,添加適量溶菌酶,併適噹延長反應時間至3h,再經純化柱吸附和洗脫的方法可以穫得更高質量的羊糞沼液總DNA.
[목적]목전소액오니중99％적미생물불가배양적,위개전양분소액중미생물다양성적연구,수대소액총DNA진행제취.[방법]연구이총DNA급기PCR산물적경지당전영결과위판정의거,이SDS결합분록방추제총DNA적방법위기출,채용축보증가정화균니、용균매렬해이급DNA순화등우화방법,병측정우화효과.[결과]후속증가적보취대제고총DNA적제취효솔급질량십분유효,소득DNA재득솔、대소이급순정도방면도유소제고,가이만족후속분자실험적요구.[결론]이SDS법위기출,용TENP화PBS세조균니,첨가괄량용균매,병괄당연장반응시간지3h,재경순화주흡부화세탈적방법가이획득경고질량적양분소액총DNA.
